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脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒微量法

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產(chǎn)品型號

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-08-16 17:01:27瀏覽次數(shù):107次

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貨號 BJ-0161152-1
脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:磷化白介su-1受體相關(guān)激1抗體Rabbit bov IgG/Biotin su化兔抗牛IgG
磷化白介su-1受體相關(guān)激1抗體Rabbit bov IgM/Biotin su化兔抗牛IgM
630-02-4二十八烷動物糖苯硼(APA)樹脂法純化試劑盒
12027-06-4碘化銨動物糖解法N-糖基分解試劑盒
9050-36-6麥芽糊精動物糖

優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn): X =103.3%。

7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。

8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒微量法

微量法

100管/96樣

BJ-0161152-1

商品介紹:

測定意義:

脂質(zhì)過氧化是動植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,脂質(zhì)過氧化物(LPO)是脂質(zhì)過氧化過程的產(chǎn)物,即ROS與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關(guān)的多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成LPO,使細(xì)胞膜的流動性和通透性發(fā)生改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變。因此,LPO常被作為機(jī)體氧化應(yīng)激的一種指標(biāo),與某些疾病的病理過程,如腫瘤、化學(xué)中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過程密切相關(guān)。

測定原理:

LPO在酸性條件下加熱,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA,MDA與硫代巴bi妥酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在535nm有最大吸收峰。

需自備的儀器和用品:

酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

10.png 

測定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。

注意事項(xiàng):

待測樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。

一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

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單核趨化蛋白3(MCP-3)試劑盒Anti-F2R Antibody雷帕霉su靶蛋白復(fù)合體2

磷脂酰肌蛋白聚糖4(GPC4)試劑盒 Anti-F3 Antibody核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白

可溶性糖蛋白130(sgp130)試劑盒Anti-F3 Antibody周期檢控Rad17蛋白(復(fù)制因子C)

硫酸乙酰肝su蛋白多糖(HSPG)試劑盒Anti-F2R Antibody磷酸化周期檢控Rad17蛋白


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