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考馬斯亮藍(lán)法蛋白含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào) | BJ-01611372-2 |
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
白蛋白含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法 | 可見(jiàn)分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01611372-2 |
商品介紹:
測(cè)定意義 白蛋白由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成,在血漿蛋白中含量最多,具有重要的生理功能,包括維持膠體滲透壓,并可與長(zhǎng)鏈脂肪酸、膽汁酸、血紅素、鈣和鎂離子等物質(zhì)結(jié)合。它擁有抗氧化性和抗凝血性,能充當(dāng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和藥物的運(yùn)輸載體,同時(shí)也是血漿PH值的緩沖劑。血清白蛋白含量直接關(guān)系到肝臟疾病、腎臟疾病、營(yíng)養(yǎng)不良或蛋白流失性腸道病癥的發(fā)生發(fā)展,是臨床檢測(cè)的一個(gè)重要指標(biāo)。 測(cè)定原理 白蛋白在pH4.2的緩沖液中帶正電荷,可與帶負(fù)電荷的染料溴甲酚綠結(jié)合形成藍(lán)綠色復(fù)合物,在波長(zhǎng)630nm處有吸收峰,在一定范圍內(nèi)其顏色深淺與白蛋白濃度成正比例。 需自備的儀器和用品 可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
干擾su相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1抗體(神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白PC4)枯草芽孢桿菌大鼠醛固酮(ALD)Elisa測(cè)定試劑盒
抑制凋亡樣蛋白2抗體耶納農(nóng)球菌神經(jīng)節(jié)肽抗體流式免疫組化“甘丙肽"
干擾su誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體中慢生華癸根瘤菌顆粒蛋白前體抗體流式免疫組化
干擾su誘導(dǎo)蛋白44抗體黑曲霉生長(zhǎng)抑su抗體流式免疫組化Anti-Somatostatin/GRIH
5-三磷suan肌受體3抗體近平滑假絲酵母DL-亮ansuan
干擾suomega 1蛋白抗體白靈側(cè)耳(白靈菇)L-高苯丙ansuan乙酯鹽suan鹽
干擾sualpha 7蛋白抗體光滑鏈霉菌漆酶
干擾suβ抗體土曲霉肝su鋰
DNA結(jié)合抑制因子1抗體球孢枝孢兔肌動(dòng)蛋白
γ干擾su誘導(dǎo)蛋白202抗體海濱適鹽菌四環(huán)su
腸型脂肪suan結(jié)合蛋白抗體秦氏蜜環(huán)菌
生長(zhǎng)抑制因子基因1抗體枯草芽孢桿菌萘啶酮suan
白介su8抗體斑污擬盤多孔孢N-癸?;?N-甲基葡糖
整合su連接激酶-1抗體小孢根霉華變種莽草suan
磷suan化KB抑制蛋白激酶α抗體枯草芽孢桿菌二苯基聯(lián)苯
白蛋白含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法糖化血紅蛋白(HbA1c)試劑盒 Anti-CDK2AP1 Antibodyc-Myc tag標(biāo)簽多肽
谷胱S轉(zhuǎn)移酶α4(GSTα4)試劑盒Anti-CDK5R2 AntibodyAU5 tag標(biāo)簽抗原
前列腺suE受體3(EP3)試劑盒Anti-CDK5R1 AntibodyAU1 tag標(biāo)簽多肽
孕烷受體(PXR)試劑盒Anti-CDK5RAP2 AntibodyGlu-Glu Tag多肽蛋白
周期su依賴性激酶4(CDK4)試劑盒 Anti-CDK5 Antibody環(huán)核苷suan陽(yáng)離子通道蛋白α2抗原
球蛋白G Fc段結(jié)合蛋白(FcγBP)試劑盒 Anti-CDK5RAP3 AntibodyC型鈉尿肽抗原
核糖核suan酶(RNASE)試劑盒 Anti-CDK6 Antibody睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗原
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
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