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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> 游離脂肪酸含量(FFA)測(cè)試盒微量法
貨號(hào) | BJ-01611179-1 |
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商品介紹:
測(cè)定意義: 游離脂肪酸,也稱為非酯化脂肪酸,在與白蛋白結(jié)合的血漿中循環(huán)。動(dòng)物血液中的游離脂肪酸 (FFA )含量是一項(xiàng)重要的生理生化指標(biāo)。血清中游離脂肪酸的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān),游離脂肪酸的濃度會(huì)因?yàn)樘悄虿?、重癥肝障礙、甲狀腺功能亢進(jìn)等疾病而上升。 測(cè)定原理: 用有機(jī)溶劑萃取FFA。含有FFA的有機(jī)液與三乙醇胺銅反應(yīng),在有機(jī)相中形成脂肪酸銅 (銅皂) FFA一Cu。Cu離子與顯色液反應(yīng)形成紫紅色絡(luò)合物。反應(yīng)形成的顏色深淺與Cu離子濃度的關(guān)系符合朗伯一比爾定律,因此可利用此反應(yīng)進(jìn)行比色。 自備的儀器和用品: 酶標(biāo)儀、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板、蒸餾水。 |
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
游離脂肪酸含量(FFA)測(cè)試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-01611179-1 |
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
兔抗熒光su抗血清*美味牛肝菌小鼠抗環(huán)胍an酸肽抗體(ACCPA)elisa定量檢測(cè)試劑盒
兔抗HRP抗血清白色噬瓊膠菌小鼠低密度脂蛋白 (LDL) elisa定量檢測(cè)試劑盒
兔抗人IgA抗血清大豆慢生根瘤菌小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGF-β3)elisa定量檢測(cè)試劑盒
兔抗人Kappa鏈抗血清(k-鏈抗血清)乳粉孢小鼠高敏甲狀腺su(u-T4)elisa定量檢測(cè)試劑盒
兔抗人IgG(γ-鏈)恒定區(qū)抗血清鞘氨盒菌屬小鼠肌酐(Cr)elisa定量檢測(cè)試劑盒
牛血清白蛋白抗血清空腸彎曲桿菌小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光suCy7標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)牛艾美耳球蟲小鼠Smad同源物7 (Smad7)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光suCy7標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對(duì)照)大腸埃希菌小鼠型纖溶酶原激活因子(PLAU/uPA)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光suCy7標(biāo)記羊IgG(流式同型對(duì)照)發(fā)皮安假絲酵母小鼠TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子4(TAF4)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光suCy7標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對(duì)照)香菇小鼠基質(zhì)金屬蛋白mei抑制因子3(TIMP-3)elisa定量檢測(cè)試劑盒
Alexa Fluor 555標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)*美味牛肝菌小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光suPE標(biāo)記兔抗FITC粉紅單端孢小鼠葡萄糖-6-磷酸酶催化亞基(G6PC)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光suPE標(biāo)記羊抗人IgA三葉草根瘤菌小鼠白介su2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光suPE標(biāo)記親合su白側(cè)耳小鼠基質(zhì)金屬蛋白mei抑制因子4(TIMP-4)elisa定量檢測(cè)試劑盒
PE標(biāo)記蛋白A漢遜德巴利酵母fabryi變種小鼠泛su蛋白(Ub)elisa定量檢測(cè)試劑盒
游離脂肪酸含量(FFA)測(cè)試盒微量法肌酸激酶(CK)試劑盒 Anti-NOX5 Antibody分化蛋白SEPT12
前列腺suF(PGF)試劑盒Anti-NOX4 AntibodySmad核相互作用蛋白1
二氧化酶(DAO)試劑盒 Anti-NOX5 Antibody突觸融合蛋白6
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/KDR)試劑盒Anti-NOX5 Antibody軟脂?;椎鞍譙prouty1
Ⅱ(F2)試劑盒 Anti-NOXA1 Antibody脫髓鞘相關(guān)蛋白SH3TC2N
蛋白聚糖4(PRG4)試劑盒Anti-NPAS2 Antibody富含脯an酸突觸相關(guān)蛋白SHANK2
抗磷脂(APA)試劑盒 Anti-NPC1 Antibody線性泛su鏈相關(guān)蛋白SHARPIN
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