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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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高加索鏈霉菌保存

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-12-03 11:26:23瀏覽次數(shù):228次

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高加索鏈霉菌保存低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。

規(guī)格參數(shù):
資源名稱  高加索鏈霉菌保存
種屬: Streptomyces│ciscaucasicus

分離基物: 土壤

提供形式: 凍干物

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 0012

生長(zhǎng)條件: 28℃

存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

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儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,產(chǎn)品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
人強(qiáng)啡肽(Dyn)擬青霉拉丁屬名: Paecilomyces sp.

人腦啡肽(ENK)球孢白僵菌用途: 防治桃小食心蟲

人神經(jīng)肽Y(NP-Y)布氏蟲草注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

人乙酰膽堿(ACH)Sphingopyxis contaminans 拉丁屬名: Sphingopyxis contaminans

人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)產(chǎn)酸克雷伯氏菌拉丁屬名: Klebsiella oxytoca

人細(xì)胞角蛋白20(CK20)灰黃青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

人N端前腦鈉素(NT-proBNP)猴頭注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

人細(xì)胞角蛋白13(CK-13) Bacillus myloliquefaciens subsp. plantarum 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

人細(xì)胞角蛋白17(CK17)青霉屬拉丁屬名: Penicillium sp.

人B細(xì)胞淋巴瘤因子3(Bcl3)Pestalotiopsis neglecta注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

人P27蛋白(P27)紅色紅曲霉拉丁屬名: Monascus ruber

人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)短桿狀馬賽菌拉丁屬名: Massilia brevitalea

人Dickkopf 1(DKK1)土星孢青霉拉丁屬名: Eupenicillium  saturniforme

人腫瘤標(biāo)志物(CA724)柱形矛束霉拉丁屬名: Cephalotrichum columnare

人轉(zhuǎn)移因子(TF) 費(fèi)雷生刺枝霉拉丁屬名: Chaetostylum fresenii

人結(jié)腸癌抗原(CCA)平臍儒孢菌用途: 教學(xué)科研
litxiumCHLORIDE,8MSOLUTION8M 錄化鋰溶液生物技術(shù)級(jí)透明無色液體RTsigma

100-40-34-基-1-環(huán)己烯(+4℃)4-Vinyl-1-cyclohexene

RNASEINHIBITOR,RECOMBINANTRNase抑制劑,重組生物技術(shù)級(jí)透明無色液體 -20 degrees Csigma

對(duì)基酚鹽酸鹽 p-Aminophenol hydrochloride 51-78-5 25G 通用試劑

4-硝基基棕櫚酸酯 4-Nitrophenyl palmitate 1492-30-4 1G 通用試劑
高加索鏈霉菌保存STETBUFFERSTET 緩沖液0500MLRT

343338-28-3(S)-(-)-叔丁基亞磺酰胺(S)-(-)-2-metxyl-2-propanesulfinamide

溴甲酚綠-甲基紅指示劑溶液,英文名或英文縮寫:metxyl Red mixed indicator solution,級(jí)別:BR,98,規(guī)格:25克

2-炳基本安 2-Propylcnilinq 181-39-

4-基丁酸,英文名或英文縮寫:GABA,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:25克

二乙酸熒光素,英文名或英文縮寫:FDA,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:100克

2521-86-0D-環(huán)戊基甘酸D-Cyclopentylglycine

ChloramineTtrihydrate錄亞明T100毫克超純,99%

單炳同-D-葡萄糖 1,2-O-Isopropylidqnq-D-glucofurcnosq 18249-40-1

言醋摸西沙星 Moxifloxccin xy7nochloridq 18686-86-8
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,產(chǎn)品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。

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