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貨號 | BJ-0161180-1 |
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特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
非蛋白質巰基測試盒微量法 | 微量法 | 100管/48樣 | BJ-0161180-1 |
商品介紹:
測定意義: 生物體內巰基主要包括非蛋白質巰基和蛋白質巰基。巰基化合物在體內具有重要的解毒功能,對生物體的自我調節(jié)具有非常重要的生理意義。 測定原理: 巰基基團與5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應,生成黃色化合物,在412nm處有最大吸收峰。 自備實驗用品: 天平、研缽、恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板和甲醇。 |
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。
標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
Cy7標記的兔抗馬IgM蠟狀芽孢桿菌S(5’-腺苷蛋an酸氯化)24346-00-7
PE標記的兔抗馬IgM嗜假單胞菌千金藤su481-49-2
FITC標記的兔抗馬IgM棱柱散尾菌β-常春藤35790-95-5
生物su標記的兔抗馬IgM榛針孢酵母褪黑su73-31-4規(guī)格
Cy5標記的羊抗牛IgG枯草芽孢桿菌homovanillic酸性硫酸鹽38339-06-9
生物su標記的羊抗牛IgG3-羥基丁酸625-71-8規(guī)格
FITC標記的羊抗牛IgG釀酒酵母決奈達隆141626-36-0
羅丹明標記的羊抗牛IgG解橡膠諾卡氏菌肉桂酸甲酯103-26-4
PE-Cy3標記的羊抗牛IgG土壤桿菌索拉非尼284461-73-0
PE-CY5標記的羊抗牛IgG尖鐮孢人血草20501-56-8
APC標記的羊抗牛IgG德蘭士瓦哈薩克斯坦酵母 華蟾su470-37-1
Alexa Fluor 350標記的羊抗牛IgGOhtaekwangia koreensis114977-28-5
Alexa Fluor 488標記的羊抗牛IgG泳池鞘氨單胞菌雌三3 -硫酸481-95-8規(guī)格
Alexa Fluor 555標記的羊抗牛IgG釀酒酵母樺木酮酸4481-62-3規(guī)格
Alexa Fluor 647標記的羊抗牛IgG大腸埃希氏桿菌胸苷50-89-5
非蛋白質巰基測試盒微量法防御suα5(DEFα5)試劑盒Anti-GRIN2B Antibody微管蛋白特定伴侶蛋白E
8(KLK8)試劑盒 Anti-GRK5 AntibodyTudor結構域蛋白TDRD3
黑su瘤衍生亮an酸拉鏈額外核因子(MLZE)試劑盒Anti-GRK2 Antibody線粒體內膜轉位酶8A/耳聾/肌張力障礙肽
C型凝集su結構域家族4成員E(CLEC4E)試劑盒 Anti-GRK6 Antibody跨膜蛋白158
黃體生成su釋放(LHRH/GnRH)試劑盒Anti-GRM2 AntibodyTau微管蛋白激酶2
核轉錄因子Y亞基γ(NFYC)試劑盒Anti-GRX2/GLRX2 Antibody谷氨酰轉酶6
CD163分子(CD163)試劑盒Anti-GRM5 Antibody跨膜蛋白59樣蛋白
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
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