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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> 淀粉磷酸化酶(SP)測(cè)試盒紫外分光光度法
貨號(hào) | BJ-01611214-1 |
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優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
淀粉磷酸化酶(SP)測(cè)試盒紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01611214-1 |
商品介紹:
測(cè)定意義: 淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過程的可逆反應(yīng)酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。 在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質(zhì)體中,負(fù)責(zé)延長(zhǎng)淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,負(fù)責(zé)葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過程中的關(guān)鍵酶。 在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無機(jī)磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個(gè)數(shù)量級(jí),一般認(rèn)為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測(cè)定意義。 測(cè)定原理: 淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵與無機(jī)磷反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸,并在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原NADP+產(chǎn)生NADPH,使340nm下吸光值增加。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
人白介su13膠孢人核受體相互作用蛋白1(NRIP1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
小鼠抗利尿激su/血管加壓su/精an酸加壓su糞腸球菌人骨髓前體抑制因子1(MPIF-1/CCL23)elisa定量檢測(cè)試劑盒
小鼠N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯an酸Pseudoduganella人核孔蛋白98kda(NUP98)elisa定量檢測(cè)試劑盒
大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物鴨沙門氏菌人低密度脂蛋白受體(LDLR)elisa定量檢測(cè)試劑盒
人白介su12球形芽孢桿菌人彈性蛋白mei3B(ELA3B)elisa定量檢測(cè)試劑盒
人白介su11偶發(fā)分枝桿菌偶發(fā)亞種人廣譜角蛋白(P-CK)elisa定量檢測(cè)試劑盒
小鼠抗血小板抗體IgG/M/A繡色土生單胞菌人二氧化酶(DAO)elisa定量檢測(cè)試劑盒
大鼠中性粒明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白大腸埃希菌人非神經(jīng)元性烯化酶(NNE)elisa定量檢測(cè)試劑盒
大鼠幽門螺旋菌IgG聚多曲霉人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)elisa定量檢測(cè)試劑盒
人白介su10雜色曲霉人蕈型乙酰受體亞型M1(M-AChRM1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
小鼠纖連蛋白火紅色紅曲菌霉人S100鈣結(jié)合蛋白B (S100B)elisa定量檢測(cè)試劑盒
小鼠FMS樣酪an酸激酶3黑根霉人肝臟糖原磷酸化酶(PYGL)elisa定量檢測(cè)試劑盒
大鼠雌激su受體清酒酵母人骨骼肌特異性受體酪an酸激酶(MUSK)elisa定量檢測(cè)試劑盒
人胰島su樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4香菇人絲an酸蛋白mei8(PRSS8)elisa定量檢測(cè)試劑盒
人胰島su樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3枯草芽孢桿菌人骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白1(GREM1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
淀粉磷酸化酶(SP)測(cè)試盒紫外分光光度法G蛋白偶聯(lián)雌受體1(GPER1)試劑盒Anti-PRLR Antibody突觸結(jié)合蛋白12
血小板衍生生長(zhǎng)因子D(FDGFD)試劑盒Anti-PRLR Antibody大腸桿志賀樣suⅡ型突變體(O139型)
脂聯(lián)su(ADP/Acrp30)試劑盒Anti-PRMT1 Antibody泛su連接酶Siah1
/甘su(GAL)試劑盒 Anti-PRMT5 Antibody磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1
N-乙酰半乳糖-6-硫酸酯酶(GAS)試劑盒Anti-PRMT1 Antibody磷酸化5-脂氧合酶
肌酸激酶同工酶MB(CKMB)試劑盒 Anti-PRND Antibody磷酸化5-脂氧合酶
粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)試劑盒 Anti-PRMT8 Antibody應(yīng)激誘導(dǎo)蛋白1
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