當(dāng)前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 超氧陰離子測試盒可見分光光度法
貨號 | BJ-0161162-2 |
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商品介紹:
測定意義: 生物體內(nèi)超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號傳導(dǎo)的作用,但積累過多時會對細(xì)胞膜及生物大分子產(chǎn)生破壞作用,導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞和組織代謝異常,從而引起多種疾病。 測定原理: 超氧陰離子與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-在對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,根據(jù)A530值可以計算樣品中O2-含量。 需自備的儀器和用品: 天平、水浴鍋、離心機(jī)、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、和蒸餾水。 |
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
超氧陰離子測試盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-0161162-2 |
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
核轉(zhuǎn)錄因子SOX6抗體釀酒酵母liriopesides B87425-34-1
核轉(zhuǎn)錄因子SOX8抗體巨大芽孢桿菌 A商陸皂甙H66656-92-6規(guī)格
STAC1蛋白抗體嗜松青霉綿毛黃芪總甙VII86764-11-6
亞砷鹽相關(guān)蛋白抗體腐皮鐮孢茯苓酸A(F)137551-38-3
雙鏈RNA結(jié)合蛋白Staufen2抗體韓國海桿狀菌野甲酯119262-68-9規(guī)格
溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體山原申氏菌苔黑酚龍膽雙糖甙164991-86-0
SNX27蛋白抗體泡囊短波單胞菌瓜子金V162857-65-0
電壓開啟的鈉離子通道SCN9A抗體黃色孢鏈霉菌新芒果苷64809-67-2
5-羥色受體4抗體孟氏假單胞菌短葶山麥冬皂苷130551-41-6
5-羥色受體3抗體Cecembia sp.lancerin81991-99-3
抑癌基因SNF2β抗體大腸埃希氏菌非洲防己3621-36-1
血清應(yīng)答因子抗體球孢白僵菌flavokawain C56798-34-6
膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體環(huán)圈鏈霉菌我officinalisinin57944-18-0
泛su樣修飾體-1抗體球孢白僵菌偽綿馬su
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體斑形葉點霉丹皮酚100291-86-9
超氧陰離子測試盒可見分光光度法蛋白磷酸酶(PP)試劑盒Anti-FMN1 Antibody溶質(zhì)載體鋅轉(zhuǎn)運3
著絲粒蛋白B(CENPB)試劑盒 Anti-FMO1 Antibody絲an酸蛋白mei抑制劑13
血清樣蛋白A(SAA)試劑盒Anti-FMO4 Antibody絲an酸/蘇an酸激酶25
Salusin α蛋白(Salusin α)試劑盒 Anti-FMO2 Antibody染色體特異性轉(zhuǎn)錄延伸因子
半乳糖苷酶β(GLβ)試劑盒Anti-FMO3 Antibody閱讀障礙相關(guān)蛋白Shootin
βsu(bTC)試劑盒Anti-FMO5 Antibody外紡錘體樣蛋白1
多巴色su異構(gòu)酶(DT)試劑盒 Anti-FMR1 Antibody溶質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白家族44成員1
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