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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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毛莖點(diǎn)霉保存

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-11-26 14:48:43瀏覽次數(shù):148次

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毛莖點(diǎn)霉保存低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
規(guī)格參數(shù):
資源名稱  毛莖點(diǎn)霉保存
種屬: Chaetophoma│sp.

分離基物: 葉

提供形式: 斜面培養(yǎng)物

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 蛇足石杉內(nèi)生真菌研究

培養(yǎng)基: 15

生長條件: 28℃

存儲(chǔ)條件: 定期移植法

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培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
產(chǎn)品僅用于科研生長條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
Bacteroides fragilis脆弱擬桿菌LAMP試劑盒英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:20T

發(fā)貨周期:1~3天

保存條件:-20℃冰凍保存。

保存期:一年

操作步驟:

1.樣品處理

(1)玻片預(yù)先用多聚賴氨酸或APES 進(jìn)行處理。

(2)細(xì)胞涂片和冰凍切片:重要的是及時(shí)固定。用 4%多聚/0.01M PBS(PH7.0---7.6)室溫下固定 30—60分鐘。0.01M PBS洗2分鐘×2次。蒸餾水洗滌 2分鐘×2次。

(3)組織:有條件時(shí)應(yīng)及時(shí)固定。常規(guī) 4%多聚/0.01M PBS(PH7.0---7.6)或10%中性緩沖福爾馬林固定4小時(shí)以上,石蠟包埋。切片常規(guī)脫蠟入水(脫蠟務(wù)必干凈)。

2.標(biāo)本片加 0.01M TBS 1:200 新鮮稀釋 Proteinase K 37℃消化 1—15分鐘,0.01M TBS洗2分鐘×3次。(細(xì)胞涂片和冰凍切片一般不消化或消化 10—60 秒鐘。新鮮石蠟切片消化 5-10分鐘。陳舊石蠟切片消化 10-15分鐘)。

3.標(biāo)本片加標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)20μl/片,以保持切片濕潤。按每張切片取 TdT和DIG-d-UTP 各1μl,加入18μl標(biāo)記緩沖液中,混勻。甩去切片上多余液體后加標(biāo)記液,20μl/片。置樣品于濕盒中,37℃標(biāo)記2小時(shí)。

4.0.01M TBS洗2分鐘×3次。

5.加封閉液 50μl/片,室溫30分鐘,甩掉封閉液,不洗。

6.用抗體稀釋液 1:100 稀釋生物素化抗抗體:(取 1ml 抗體稀釋液加生物素化抗抗體10μl),混勻后 50μl/片加至標(biāo)本片上。置樣品于濕盒中,37℃反應(yīng)30分鐘。0.01M TBS洗2分鐘×3次。

7.用抗體稀釋液 1:100 稀釋 SABC-FITC/(SABC-POD):取 1ml 抗體稀釋液加 SABC-FITC/(SABC-POD 10μl,混勻后 50μl/片加至切片。37℃反應(yīng)30分鐘。0.01M TBS洗5分鐘×4次。

8.加 SABC-FITC的在熒光顯微鏡下用藍(lán)色光激發(fā)觀察。

9.加 SABC-POD的,可選用 DAB 顯色:取 1ml 蒸餾水,分別加入 DAB 試劑盒中 A,B,C 試劑各一滴,混勻后加至標(biāo)本片上,顯色 10-30分鐘左右。水洗。

10.蘇木素輕度復(fù)染。0.01M TBS洗,蒸餾水洗。水溶性封片劑封片。
甲醇/二氯(1:1)中?溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒E型探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中萘溶液 1.2mL Adevirus(AV)腺病毒F型PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中萘溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒F型染料法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中菲-D10溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒F型探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中菲溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒通用PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中二氫苊溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒通用染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中苯并[K]熒蒽溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中苯并[b]熒蒽溶液 2ml Aeromonas hydrophila嗜水氣單胞菌PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中苯并[a]蒽溶液 2ml Aeromonas hydrophila嗜水氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中苯并[a]芘溶液 2ml Aeromonas hydrophila嗜水氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中氟甲腈溶液(無證書) 1mL Aeromonas punctata斑點(diǎn)氣單胞菌PCR試劑盒

丙酮中氟蟲腈硫醚溶液(無證書) 1mL Aeromonas punctata斑點(diǎn)氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中氟蟲腈砜溶液(無證書) 1mL Aeromonas punctata斑點(diǎn)氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中亞砜溶液(無證書) 1mL Aeromonas salmonicida滅鮭氣單胞菌PCR試劑盒

丙酮中砜溶液(無證書) 1mL Aeromonas salmonicida滅鮭氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒
毛莖點(diǎn)霉保存人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒英文名稱:Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule,ALCAM ELISA Kit*

人白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒英文名稱:human leukocyte immuglobulin-like receptor subfamily B member 4,LILRB4 ELISA Kit進(jìn)口/分裝

人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA試劑盒英文名稱:Human leukoregulin,LR ELISA Kit *

人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒英文名稱:Human Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA Kit 進(jìn)口/分裝

人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒英文名稱:Human leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit *

人百日咳毒素(PT)ELISA試劑盒英文名稱:Human Pertussiu Toxin,PT ELISA Kit*

 

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