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儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
規(guī)格參數(shù):
資源名稱 赭曲霉保存
種屬: Aspergillus│ochraceus
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: no
應用領(lǐng)域: 可產(chǎn)生赭曲霉毒素A; 降解DNA
培養(yǎng)基: 14
生長條件: 25-28℃
存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
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培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
產(chǎn)品僅用于科研生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
基本概念:
(1)菌群:由多種細菌混合組成的相對穩(wěn)定的細菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當涉及到細菌保存時,菌種是指細菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內(nèi)的細菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
“黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(MEMα,不含核苷)金針菇注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
“黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(McCoy's 5A,含HEPES)解脂鹽紅菌拉丁屬名: Halorubrum lipolyticum
“黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(MEM)鴨疫里氏桿菌拉丁屬名: anatipestifer
“黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(MEMα)南極類芽孢桿菌拉丁屬名: Paenibacillus antarcticus
CMRL(不含L-谷氨酰胺)猬木霉拉丁屬名: Trichoderma erinaceum
TNM-FH昆蟲細胞培養(yǎng)基溶血不動桿菌基因型4拉丁屬名: Acinetobacter haemolyticus/genospecies 4
“黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(RPMI-1640)貝倫格葡萄座腔菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
“黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(DMEM低糖)鴨疫里氏桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
“黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(DMEM/F12)抗生鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces antibioticus
“黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(DMEM高糖)黃桿菌拉丁屬名: Flavobacterium sp.
BGJb(Fitton-Jackson改良)小孢根霉原變種拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. microsporus
Grace's昆蟲細胞培養(yǎng)基中慢生根瘤菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Brinster's BMOC-3(不含L-谷氨酰胺、酚紅)溜曲霉拉丁屬名: Aspergillus tamarii
“黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(DMEM/F12,含HEPES)多孢木霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Waymouth's MB 752/1蘇云金芽胞桿菌用途: 用于抗蟲基因的分離和抗蟲相關(guān)基礎(chǔ)研究。
BME(不含L-谷氨酰胺)臭曲霉用途: 糖化酶產(chǎn)生菌
Propylenecaonate碳酸酯1公斤BR,95%
37311-05-0帕拉派克 NPORAPAK N (100-200 MESH ASTM) FOR GC
Wangresin王樹脂500克BR
對叔丁基酚 p-tert-Butylphenol,99% 98-54-4 100G 通用試劑
化銣/Rubidium chloride AR,99% 5克 國產(chǎn)/進口
赭曲霉保存Sodaasbestos堿石棉10克CP,98%
油紅 0 Solvqnt Rqd 23 82-86-9
5-Chloro-2-nitnopxenylboronic acid pinacol ester 1073353-99-7
N-乙酰-D-半乳糖胺 N-Acetyl-D-galactosamine,≥98% 1811-31-0 100MG 通用試劑
L-丙酸/α-基丙酸/L-α-丙酸/L-初油基酸/基丙酸/L-Alanine BR,99% 5克 國產(chǎn)/進口
二氫錄化嘌呤毒素,英文名或英文縮寫:Puromycin dixy7nochloride,級別:3400~20100,液體,5條帶,規(guī)格:100毫克
1892-57-51-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亞胺1-(3-Dimetxylaminopropyl)-3-etxylcarbodiimide
組嶙酸鹽,英文名或英文縮寫:Histamine diphospate,級別:BR,98%,規(guī)格:5克
刀豆蛋白A-瓊脂糖凝... Con A Sepharose 4B N/A 25ML 通用試劑
乙基甲磺酸脂 Ethyl methanesulfonate (≥99%, EMS, li... 62-50-0 5G 通用試劑
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