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貨號 | BJ-01611221-2 |
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
蔗糖磷酸合成酶(SPS)測試盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-01611221-2 |
商品介紹:
測定意義
蔗糖不僅是重要的光合產(chǎn)物,也是植物體內(nèi)運(yùn)輸?shù)闹饕镔|(zhì),還是碳水化合物的貯存形式之一。SPS(EC 2.4.1.14)以果糖-6-磷酸為受體,形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系統(tǒng)看作是蔗糖合成的主要途徑。
測定原理
蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸,蔗糖磷酸與間苯er酚反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小與顏色的深淺成正比。
需自備的的儀器和用品
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水 |
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶4抗體不吸水鏈霉菌無水
神經(jīng)分化因子6抗體芽孢桿菌十三烷
同源盒蛋白Meis2抗體貝倫格葡萄座腔菌苦蒿su
Meteorin神經(jīng)膠質(zhì)分化調(diào)節(jié)蛋白抗體白被黑蛋巢尼美
棕櫚?;さ鞍?/span>5抗體根瘤菌L-絲an酸甲酯鹽酸鹽
腦蛋白239抗體嗜酸乳桿菌L-去甲腎上腺su
同源盒蛋白MEIS3抗體中慢生華癸根瘤菌胡黃連苷-Ⅱ
顆粒分化蛋白抗體毛木耳(紫木耳、黃背木耳)羌活
單氨氧化酶A+B抗體支氣管敗血波氏菌CBZ-D-纈an酸
膜蛋白相互作用蛋白RGS16抗體運(yùn)動節(jié)桿菌結(jié)晶碳酸鈉
膜型絲an酸蛋白mei2抗體白僵菌α-亞麻酸
多藥耐藥相關(guān)蛋白8/9/14抗體釀酒酵母丙二酸
Mob1同源蛋白MOBKL2B抗體米曲霉2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二羧酸鈉
Mob1同源蛋白MOBKL2C抗體球毛殼偏釩酸鈉
復(fù)合型表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體大腸埃希菌1-萘磷鹽
蔗糖磷酸合成酶(SPS)測試盒可見分光光度法基質(zhì)金屬蛋白mei抑制因子3(TIMP-3)試劑盒Anti-PYY Antibody磷酸化核突觸蛋白α
Rap鳥交換因子1(RAPGEF1)試劑盒Anti-PYROXD1 Antibody離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白SLC7A9
骺蛋白聚糖(EPYC)試劑盒 Anti-PTTG1 Antibody乙酰fu酶A轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1
過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)試劑盒Anti-PVRL1/NECTIN1 Antibody滑膜肉瘤X斷點(diǎn)蛋白5
甲狀腺su受體α(THRα)試劑盒 Anti-RAB10 Antibody腫瘤/抗原11.3
輔肌動蛋白α3(ACTN3)試劑盒Anti-RAB11A Antibody外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白1
胰高血糖su樣肽1(GLP-1)試劑盒 Anti-RAB11B Antibody唾液酸結(jié)合性球蛋白樣凝集su11
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
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