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NADP蘋果酸酶(NADPME)測(cè)試盒紫外分光光度法
貨號(hào) | BJ-0161115-2 |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱:輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒可見分光光度法
規(guī)格:50管/24樣
貨號(hào):BJ-0161115-2
檢測(cè)方法:可見分光光度法
產(chǎn)品分類:輔酶Ⅱ系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月
商品介紹:
測(cè)定意義: fu酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,NADP+和NADPH含量測(cè)定可以計(jì)算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應(yīng)密切相關(guān)。NADPH/NADP+比值不僅是細(xì)胞氧化還原態(tài)的主要標(biāo)志之一,而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調(diào)控作用。 測(cè)定原理: 分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用,使氧化型噻唑藍(lán)(MTT)還原為甲瓚,570nm下檢測(cè)吸光值,從而測(cè)定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH,從而檢測(cè)NADP+含量。 所需的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
脂滴相關(guān)蛋白TIP47抗體薩氏艾美耳球蟲人晶狀體上皮*培養(yǎng)基
腫瘤抑制基因Testin抗體平臍蠕孢菌大鼠腦成纖維*培養(yǎng)基
腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記相關(guān)蛋白質(zhì)7抗體樟疫霉大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮*培養(yǎng)基
環(huán)指蛋白HCG1抗體彩色豆馬勃大鼠胰腺導(dǎo)管上皮*培養(yǎng)基
三核苷酸重復(fù)蛋白6B抗體蘇云金芽孢桿菌大鼠氣管和支氣管上皮*培養(yǎng)基
扭轉(zhuǎn)蛋白A抗體六孢毛殼人腦靜脈血管內(nèi)皮*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體鹽球菌人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體榮州假黃單胞菌大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體鹽生鹽古桿菌大鼠腦膜*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體橙磷傘大鼠膀胱平滑肌*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體釀酒酵母人腦成纖維*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體根瘤菌人成骨*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體石頭農(nóng)霉菌小鼠肝動(dòng)脈平滑肌*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體豐盛毛霉小鼠食管上皮*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體埃里鏈格孢小鼠外周血白*培養(yǎng)基
輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒可見分光光度法蛋白聚糖(PG)試劑盒Anti-CTCF Antibody磷酸化原癌基因c-Met相關(guān)酪an酸激酶
絨毛蛋白(CVL/EZR)試劑盒 Anti-CTBP2 Antibody磷酸化急性髓白血病1蛋白
白介su2(IL-2)試劑盒Anti-CTH AntibodyDNA修復(fù)蛋白R(shí)ad23
甘露糖凝集su受體(MBLR)試劑盒 Anti-CTLA4 Antibody組織相容性復(fù)合物RTF1
周期su依賴性激酶1(CDK1)試劑盒 Anti-CTNNA1 Antibody核糖核苷酸還原酶1
TU3A蛋白(TU3A)試劑盒Anti-CTH Antibody環(huán)指蛋白167
半胱氨酰白三烯受體1(CYSLTR1)試劑盒 Anti-CTHRC1 Antibody抵抗su
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
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