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海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào) | BJ-01611223-2 |
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法 | 可見(jiàn)分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-01611223-2 |
商品介紹:
測(cè)定意義 蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH,將高等植物Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類(lèi)型。 NI主要存在于細(xì)胞質(zhì)中,負(fù)責(zé)分解細(xì)胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。測(cè)定原理NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過(guò)光吸收增加速率來(lái)計(jì)算NI活性 自備用品 可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
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優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋?zhuān)划?dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
線粒體鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體球色單隔孢屬土拉熱弗朗西斯菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
磷酸化原癌基因c-Met抗體玫瑰色庫(kù)克菌阿古尼嗜血桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體地圓形菌副嗜血桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
甘露聚糖結(jié)合凝集su絲an酸肽酶1抗體黃褐環(huán)銹傘壞死梭桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
胃動(dòng)su受體抗體隱球酵母屬擬枝孢鐮刀菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
特異性MLT5蛋白抗體匍枝根霉(黑根霉)梨孢鐮刀菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
軟骨基質(zhì)蛋白抗體熒光假單胞菌藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
絲裂原活化蛋白激酶MKK7抗體滑菇地霉屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
甘露聚糖結(jié)合凝集su絲an酸肽酶2抗體植物乳桿菌植物亞種禽嗜血桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
微小染色體維持缺陷蛋白2抗體立枯絲核菌肝胰腺細(xì)小病探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
微小染色體維持缺陷蛋白3抗體大腸埃希菌火皰疹病探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
基質(zhì)金屬蛋白mei-26抗體褐粘褶菌禽腺病C型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體Marella endophytica鐮刀菌通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
MYOZ抗體堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌賈第蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
單核趨化蛋白2抗體白僵菌嗉囊食通蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法B分化因子(BCDF)試劑盒 Anti-RAD51C Antibody抗IgM抗血清
甘露聚糖結(jié)合凝集su相關(guān)絲an酸蛋白mei(MASP)試劑盒Anti-Rad9b Antibody抗狗IgG抗血清
低氧上調(diào)節(jié)因子1(HYOU1)試劑盒 Anti-RAG1 Antibody抗羊IgM抗血清
黑su瘤衍生亮an酸拉鏈額外核因子(MLZE)試劑盒Anti-Rad9/Rad9a Antibody抗IgG抗血清
血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)試劑盒Anti-RAG2 Antibody抗IgM抗血清
鈣調(diào)磷酸酶(CaN)試劑盒 Anti-RAF1 Antibody抗人IgG抗血清
色suP450氧化還原酶(CPR)試劑盒 Anti-RALA Antibody抗人IgM抗血清
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
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