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基本概念:
(1)菌群:由多種細菌混合組成的相對穩(wěn)定的細菌群體,產品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產氣腸細菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類細菌群體,與同屬內其他種有著明顯差異;當涉及到細菌保存時,菌種是指細菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內的細菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
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規(guī)格參數:
資源名稱 日本根霉規(guī)格
種屬: Rhizopus│japonicus
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 0017
生長條件: 25-28℃
存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
儀器設備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,產品僅用于科研從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數,而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
Canine Influenza Virus(CIV)犬流感病毒通用LAMP試劑盒英文名稱:
產品規(guī)格:500T
發(fā)貨周期:1~3天
PKH67/PI 雙染細胞毒性檢測試劑盒是利用細胞熒光染料PKH67和PI對細胞進行染色,利用PKH67標記靶細胞,PI標記死的靶細胞來區(qū)分不同的細胞,活的靶細胞成綠色,死的靶細胞成紅色和綠色,從而檢測細胞毒性作用。
根據不同的實驗方案設計,可以用來檢測化合物的細胞毒性作用。也可以用來檢測殺傷性T 細胞或NK 細胞介導的細胞毒作用。
熒光染料PKH67是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料,可以標記活體細胞,通過與膜結構的脂質分子結合而標記細胞。對細胞毒性較小,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細胞膜,有著強而穩(wěn)定的綠色熒光。經PKH67標記的細胞可用于體外和體內增殖研究,且具有不會使鄰近細胞染色的功能。
在細胞分裂增殖過程中,PKH67的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減,標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,因此其熒光強度是親代細胞的一半,根據這一特性,它可被用于檢測細胞增殖,細胞周期的估算及細胞分裂等方面。PKH67標記細胞的熒光非常均一,并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中,PKH67標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半,通過流式細胞儀根據熒光強度的不同,可檢測出未分裂細胞,分裂一次(1/2的熒光強度),二次(1/4的熒光強度),三次(1/8的熒光強度),以及更多分裂次數的細胞。PKH67可檢測分裂次數多達六次甚至更多。
除了用于細胞增殖檢測,PKH67 還可以用于細胞的體外盒體內示蹤,標記后熒光在胞內表達穩(wěn)定,陽性標記率達98%以上,標記細胞形態(tài)良好,能有效地觀察細胞在體外的誘導分化情況;或將標記的細胞注入體內,可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。
PKH67標記的細胞用于體內觀察可以長達數周之久,它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。PKH67 毒性較小,不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患??梢愿焖伲鼫蚀_和更安全地得到想要的實驗數據。
PKH67/PI標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞毒性檢測。
PKH67標記細胞呈綠色熒光,熒光波長:λex=490 nm,λem=502 nm。流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm,此時的發(fā)射波長為502nm,使用流式細胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。PI標記細胞呈紅色熒光,流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm,此時的發(fā)射波長為647nm,使用流式細胞儀檢測時可以采用FL2 detection channel。
PKH67標記的細胞除了流式細胞儀檢測細胞毒性外,還可單染后用于細胞增殖檢測,或者用熒光酶標板定量活細胞數目,或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。
儲存條件:-20℃避光保存。
連翹脂苷BLeukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit純度:≥98%
靈芝Aleucocyte antigen-B27 ELISA Kit純度:≥94%
靈芝BALCAM ELISA Kit純度:≥94%
蘆薈苷ALTC4 ELISA Kit純度:≥98%
魯斯可皂苷元LTB4 ELISA Kit純度:鑒別用(80%)
羅漢果皂甙IVInterleukin-9,IL-9 ELISA KIT純度:≥98%
塞琳IL-8 ELISA Kit純度:≥95%
Rat anti-Mocyte antibody,AMA ELISA Kit大鼠抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121309-TLC法鑒別馬蘭草規(guī)格:2.0g
Rat oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit大鼠氧化低密度蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121310-TLC法鑒別紫檀香規(guī)格:0.5g
Rat Anti-Smooth Muscle Antibody,ASMA ELISA Kit大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒進口/分裝規(guī)格:96T/48T121311-200402TLC法鑒別絞股藍規(guī)格:2.0g
Rat nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒進口/原裝規(guī)格:96T/48T121312-200301TLC法鑒別鳳尾草規(guī)格:1.0g
Rat Thrombin activatable fibrilysis inhibitor,TAFI ELISA Kit大鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121313-200503TLC法鑒別鐵筷子規(guī)格:2.0g
Rat plaet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISA Kit大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121314-200402TLC法鑒別吉祥草規(guī)格:2.0g
日本根霉規(guī)格豬主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)ELISA試劑盒 英文名稱:swine major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠ ELISA Kit進口/分裝
豬主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA試劑盒英文名稱:swine major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡ ELISA Kit進口/原裝
豬主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA試劑盒英文名稱:swine major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢ ELISA Kit進口/原裝
豬轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine transforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit進口/分裝
豬轉化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒 英文名稱:Porcine Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA Kit進口/分裝
豬組胺(HIS)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Histamine,HIS ELISA Kit*
豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Tissue-type Plasimigen Actilyse,t-PA ELISA Kit進口/分裝
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