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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 單寧酶(TAN)測(cè)試盒紫外分光光度法
類(lèi)黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT)測(cè)試盒微量法
總抗氧化能力(FRAP法)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào) | BJ-0161178-2 |
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
單寧酶(TAN)測(cè)試盒紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-0161178-2 |
商品介紹:
測(cè)定意義: 單寧酶全稱(chēng)是單寧酯酰水解酶(Tannase,EC 3.1.1.20),它可以水解沒(méi)食子酸單寧中的酯鍵和縮酚羧鍵,生成沒(méi)食子酸和葡萄糖。 測(cè)定原理: 使用抗氧化劑沒(méi)食子酸丙酯(PG)作為單寧酶酶促反應(yīng)的底物,在270nn下測(cè)定底物PG反應(yīng)前后的光密度變化,計(jì)算單寧酶酶活力。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰、蒸餾水。 |
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線(xiàn)粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋?zhuān)划?dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
PE標(biāo)記的兔抗豬IgG臺(tái)中金黃桿菌S -腺苷- L - methtonine17176-17-9
PE-CY5標(biāo)記的兔抗豬IgG豌豆根瘤菌(都不提供)5-氮-2’-脫氧胞苷2353-33-5
PE-Cy7標(biāo)記的兔抗豬IgG圓褐固氮菌蟾酥464-74-4
生物su標(biāo)記的兔抗豬IgG大腸埃希氏桿菌1 -茚滿(mǎn)酮83-33-0
生物su標(biāo)記的兔抗大鼠IgG噬組氨節(jié)桿菌488-82-4
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗兔IgM變幻青霉apigenin-7-glucuronide29741-09-1
PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgG鶴羽田戴爾福特菌胭脂紅1390-65-4
Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗兔IgG戊糖片球菌龍血suC956103-79-0
Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗兔IgG孟氏假單胞菌肉桂酸芐酯103-41-3
Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgG淺絳紅鏈霉菌fraxinol486-28-2
PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗兔IgG無(wú)雌三3 dihexanoate104202-96-2
Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗兔IgG宇佐美曲霉69-65-8規(guī)格
Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗兔IgG圣格奧爾根菌luteollin 5-glucoside20344-46-1規(guī)格
Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗兔IgG多主葡萄殼菌補(bǔ)骨脂定18642-23-4
Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗小鼠IgG莖瘤固氮根瘤菌地衣酚504-15-4
單寧酶(TAN)測(cè)試盒紫外分光光度法3-硝基酪an酸(3-NT)試劑盒 Anti-GRB2 Antibody協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7
骨粘連蛋白(ON)試劑盒Anti-GRB10 Antibody微管卷曲蛋白SYNC
Rho GDP解離抑制因子α(ARHGDIα)試劑盒Anti-GRB7 Antibody磷酸化SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌SHIP1
橋粒芯糖蛋白-1(DSG-E1)試劑盒 Anti-GRB7 Antibody磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1
白介su24 (IL-24)試劑盒Anti-GREM1 Antibody線(xiàn)粒體促凋亡蛋白
集落激因子2受體α (CSF2Rα)試劑盒Anti-GREM1 Antibody墨蝶蛉還原酶
甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)試劑盒 Anti-GRIA1 Antibody核突觸蛋白α+β
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
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