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基本概念:
(1)菌群:由多種細菌混合組成的相對穩(wěn)定的細菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細菌保存時,菌種是指細菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內(nèi)的細菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
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規(guī)格參數(shù):
資源名稱 靈芝說明書
種屬: Ganoderma│lucidum
分離基物: 朽木
提供形式: 斜面培養(yǎng)物
安全等級: 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 生產(chǎn)食用菌
培養(yǎng)基: 17
生長條件: 20℃
存儲條件: 定期移植法
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,產(chǎn)品僅用于科研從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
Bacillus atrophaeus芽孢桿菌LAMP試劑盒英文名稱:Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格:100T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒各組分均以無菌形式提供,可直接用于細胞實驗。臺盼藍(Trypan Blue),一種偶氮、親水性酸性藍色染料,可透過死亡細胞和垂死細胞的細胞膜,將其染成藍色,而活細胞由于其細胞膜的完整性,可將臺盼藍排斥在外,因此,通過顏色的變化即可將活細胞(活細胞呈透明無色)和死細胞鑒別開來,基于此原理,本品廣泛用于細胞活性水平的常規(guī)評估。臺盼藍還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺盼藍與蛋白結(jié)合形成的復(fù)合物可發(fā)出紅色熒光。另外,臺盼藍(合適濃度)還常用來淬滅細胞表面的自熒光或者其他熒光信號。
使用方法
1)對于懸浮細胞,離心收集細胞,對其充分清洗后,加入適量細胞重懸液重懸細胞制成單細胞懸液;對于貼壁細胞,先用胰酶消化細胞,再按照懸浮細胞的方法制備單細胞懸液。
2)取0.1ml單細胞懸液,按照1:1比例與0.1ml 0.4%臺盼藍染色液充分混勻,室溫染色3~10min。
【注】:因臺盼藍具有細胞毒性,染色時間過久會導(dǎo)致部分死細胞染色,干擾計數(shù)。通常染色3min即可。
3)取少量上述染色細胞加入血細胞計數(shù)板,于顯微鏡低倍鏡下計數(shù),分別計算著色細胞(即損傷細胞和死細胞)和總細胞。
【注1】:用移液槍加染色細胞時,沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其*覆蓋住整個小室。不可過量加液或者不足量。
【注2】:1mm2方格內(nèi)細胞數(shù)通??刂圃?0-50 cells,當(dāng)細胞數(shù)超過200個,需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。
4)按照以下公式來計算細胞數(shù)目和活細胞百分比,
a,計算每ml細胞數(shù)目:Cells/ml=1mm2大方格內(nèi)的平均細胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×104;【注】:此時的稀釋倍數(shù)為:步驟2所取的單細胞懸液與臺盼藍染色液混合后的稀釋倍數(shù)
b,總細胞數(shù)目:Total cells=(Cells/ml)×初制備單細胞懸液的總體積
c,細胞活力值:Viability(%)=(總細胞數(shù)-總著色細胞數(shù))/總細胞數(shù)×100
【注】:通常情況,健康的對數(shù)期培養(yǎng)細胞,活細胞至少占到95%。
儲存條件:室溫,有效期2年
甲醇中1,4-二溶液 1.2ml Adevirus(AV)腺病毒C型染料法熒光定量PCR試劑盒
甲醇中1,3-二溶液 1.2ml Adevirus(AV)腺病毒C型探針法熒光定量PCR試劑盒
甲醇中1,2-二溶液 1.2ml Adevirus(AV)腺病毒D型PCR試劑盒
甲醇中1,2-二氯苯-d4溶液 1.2ml Adevirus(AV)腺病毒D型染料法熒光定量PCR試劑盒
甲醇/二氯(1:1)中芴溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒
甲醇/二氯(1:1)中苊溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒E型PCR試劑盒
甲醇/二氯(1:1)中芘溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒E型染料法熒光定量PCR試劑盒
甲醇/二氯(1:1)中?溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒E型探針法熒光定量PCR試劑盒
甲醇中萘溶液 1.2mL Adevirus(AV)腺病毒F型PCR試劑盒
甲醇/二氯(1:1)中萘溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒F型染料法熒光定量PCR試劑盒
丙酮中菲-D10溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒F型探針法熒光定量PCR試劑盒
甲醇/二氯(1:1)中菲溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒通用PCR試劑盒
甲醇/二氯(1:1)中二氫苊溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒通用染料法熒光定量PCR試劑盒
甲醇/二氯(1:1)中苯并[K]熒蒽溶液 2ml Adevirus(AV)腺病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒
甲醇/二氯(1:1)中苯并[b]熒蒽溶液 2ml Aeromonas hydrophila嗜水氣單胞菌PCR試劑盒
靈芝說明書小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Leukotriene C4,LT-C4 ELISA Kit*
小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA Kit *
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit*
小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Cystatin C,Cys-C ELISA Kit*
小鼠苯丙氨酸(LPA)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse L-phenylalanine,LPA ELISA Kit進口/分裝
小鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA Kit*
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