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貨號 | BJ-01611137-1 |
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
轉(zhuǎn)氫酶2測試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-01611137-1 |
商品介紹:
測定意義:TH位于線粒體的內(nèi)膜上,又稱為線粒體復(fù)合體六,催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化,調(diào)節(jié)線粒體NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反應(yīng)稱為TH-2,催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。測定原理:NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+,TH-2催化APAD+還原生成APADH,APADH在375nm有特征光吸收,測定375nm光吸收的增加速率,來計算TH-2活性。需自備的儀器和用品:可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
雙皮質(zhì)su抗原地星猴組織蛋白meiD(CTSD)elisa定量檢測試劑盒
損傷DNA結(jié)合蛋白2抗原鹽沼鹽桿菌猴組織因子(TF)elisa定量檢測試劑盒
防御suβ1抗原根桿菌屬猴G蛋白β1(GNβ1)elisa定量檢測試劑盒
防御suβ1抗原(人)樟疫霉*豬乳酸脫氫酶B(LDHB)elisa定量檢測試劑盒
防御suβ2抗原(小鼠)釀酒酵母豬過氧化還原酶5(PRDX5)elisa定量檢測試劑盒
防御suβ2抗原(大鼠)pIB139豬丙酮酸激酶M2型同工酶(PKM2)elisa定量檢測試劑盒
凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗原龜裂鏈霉菌猴GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)elisa定量檢測試劑盒
鴨甲型肝炎A病抗原粗糙擬迷孔菌猴尿su酶相關(guān)蛋白C(UreC)elisa定量檢測試劑盒
結(jié)蛋白抗原大囊接霉猴胸腺基質(zhì)淋巴生成su(TSLP)elisa定量檢測試劑盒
抑癌蛋白DKK1抗原草菇猴抗白蛋白抗體(AAA)elisa定量檢測試劑盒
DMBT1抑癌基因抗原大豆慢生根瘤菌豬血小板親和蛋白2(PKP2)elisa定量檢測試劑盒
DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原鴨疫里氏桿菌豬白介su16(IL-16)elisa定量檢測試劑盒
多能發(fā)育相關(guān)基因2抗原鏈狀雙歧桿菌猴血管緊張suII受體2(ANGⅡR2)elisa定量檢測試劑盒
死亡受體4抗原略紫鏈霉菌豬GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)elisa定量檢測試劑盒
腫瘤調(diào)亡su/死亡受體5抗原地衣生考克娃酵母豬肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)elisa定量檢測試劑盒
轉(zhuǎn)氫酶2測試盒微量法周期su依賴性激酶抑制因子3(CDKN3)試劑盒 Anti-LDHA Antibody(PB1129)同源蛋白UNCX
血管緊張su原(AGT)試劑盒 Anti-LDHB Antibody(PB1130)UL16結(jié)合蛋白3
骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒 Anti-LEP Antibody去泛su化酶22
神經(jīng)肽Y受體Y2(NPYR2)試劑盒Anti-LEP AntibodyRNA聚合酶I
泛su羧基端酯酶L1(UCHL1)試劑盒Anti-LDLR Antibody尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運子1
肌營養(yǎng)不良蛋白關(guān)聯(lián)糖蛋白1(DAG1)試劑盒 Anti-LEP Antibody囊泡轉(zhuǎn)運蛋白Use1
凝集su樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)試劑盒Anti-LEP Antibody上游結(jié)合蛋白1
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
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