4T1小鼠乳腺癌細胞-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	A01X1026	規(guī)格	1×106
英文名稱	4T1細胞	產品分類	小鼠細胞系
實驗類型	1640+10%FBS+1%P/S	報告	（STR鼠源鑒定）報告

公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

名稱	4T1（小鼠乳腺癌細胞）（STR鑒定正確）
別稱	4T1-A
種屬	小鼠
年齡（性別）	不詳
組織來源	乳腺組織
生長特性	貼壁細胞
細胞形態(tài)	上皮細胞樣
背景描述	4T1細胞是從410.4瘤株中未經誘變篩得的6-硫鳥嘌噙抗性細胞株。當4T1細胞注射到BALB/c小鼠中時，4T1細胞會自發(fā)產生高轉移腫瘤，可轉移到肺、肝、淋巴結和大腦，同時在注射部位形成始發(fā)灶，誘導轉移時不需要摘除始發(fā)灶。4T1細胞在BALB/c小鼠中的生長與轉移特性與人體中的乳腺癌十分相近，這種腫瘤是人Ⅵ期乳腺癌的動物模型。4T1細胞誘導的腫瘤在手術后及未手術情況下轉移的動力學相近，可以用作手術后及未手術模型。4T1細胞誘導的腫瘤模型跟其他腫瘤模型相比，由于4T1細胞的抗6-硫鳥嘌噙特性，微小的轉移細胞團(少到僅僅1個)也可以在許多遠端器官中檢測到，沒必要數淋巴結或稱重器官。
生物安全等級	1
生長培養(yǎng)基	RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例	1:3-1:4
推薦換液頻率	2~3次/周
凍存條件	凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40?S+5%DMSO 溫度：液氮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃
致瘤性	Yes, forms tumors and metastasizes in BALB/c mice.
保藏機構	ATCC; CRL-2539

細胞傳代：

1. 4T1小鼠乳腺癌細胞試驗準備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應。

5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細胞，細胞計數后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉染。

細胞轉染：

1. 轉染試劑的準備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質體體積：DNA 質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉染試劑，再次震蕩。

重組人結合珠蛋白	同人皰疹病毒4型PCR檢測試劑盒
擬態(tài)弧菌PCR試劑盒	鈣蛋白mei6ELISA試劑盒
人成纖維細胞生長因子10(FGF10)檢測試劑盒elisa	分揀連接蛋白1ELISA試劑盒
人CD34分子(CD34)ELISA試劑盒	Embigin蛋白ELISA試劑盒
人C多肽(CP)試劑盒elisa	肺炎衣原體ELISA試劑盒
人Rho關聯含卷曲螺旋蛋白激mei2(Rock-2)ELISA檢測試劑盒	suan性成纖維細胞生長因子ELISA試劑盒
核突觸蛋白-α封閉多肽	飾紋汀蛙虹彩病毒PCR試劑盒
TRANK1蛋白封閉多肽	綿羊夏伯特線蟲PCR試劑盒
DNAmei1樣蛋白1封閉多肽	犬細小病毒PCR試劑盒
真核翻譯起始因子2C2封閉多肽	豬痢疾密螺旋體PCR檢測試劑盒
DNHD1蛋白封閉多肽	牛乳頭瘤病毒PCR檢測試劑盒
細胞表面趨化因子受體6（CD196）封閉多肽	4T1小鼠乳腺癌細胞牡蠣包拉米蟲PCR試劑盒
前列腺suE2受體2封閉多肽	綿羊源性成分PCR試劑盒
FAM47E蛋白封閉多肽	牛皰疹乳頭炎病毒PCR試劑盒
磷suan化視網膜母細胞瘤相關蛋白1封閉多肽	牛皰疹病毒通用PCR試劑盒

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內的培養(yǎng)液成分如蛋白質等燒焦后會產生有害物質，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。