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4T1+luc小鼠乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記
C3H/10T1/2 Clone8 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
| 貨號 | A01X1115 | 規(guī)格 | 1×106 |
|---|---|---|---|
| 英文名稱 | TM4細(xì)胞 | 產(chǎn)品分類 | 小鼠細(xì)胞系 |
| 實(shí)驗(yàn)類型 | DMEM/F12+2.5%FBS+5%馬血清+1%P/S | 報告 | （STR鼠源鑒定）報告 |
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
名稱 | TM4 (正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
別稱 | TM-4 |
種屬 | 小鼠 |
年齡（性別） | 11-13日齡 |
組織來源 | 睪丸 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
背景描述 | TM4細(xì)胞在FSH的作用下cAMP產(chǎn)量增加，但對LH無反應(yīng)；TM4細(xì)胞與原代Sertoli細(xì)胞相比，對FSH的反應(yīng)性降低。據(jù)報道，TM4細(xì)胞組成性纖溶酶原激活物的產(chǎn)量很低，但可被FSH刺激產(chǎn)生，受維甲酸刺激可有大幅增高。TM4細(xì)胞可產(chǎn)生視黃結(jié)合蛋白、組織纖溶酶原激活物和轉(zhuǎn)鐵蛋白；TM4細(xì)胞表達(dá)FSH受體、雄激素受體和孕激素受體；鼠痘病毒陰性。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM/F12＋5% HS＋2.5% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
致瘤性 | No, The cells were not tumorigenic in immunosuppressed mice, but did form colonies in semisolid medium. |
基因表達(dá)情況 | retinol binding protein, tissue plasminogen activator, transferrin |
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-1715 BCRC; 60254 ECACC; 88111401 |
細(xì)胞傳代：
1. TM4正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞試驗(yàn)準(zhǔn)備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。
5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細(xì)胞分散開。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。
7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)后選擇 0.8X106 個細(xì)胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。
8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。
9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染：
1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。
高表達(dá)神經(jīng)上皮蛋白BTG3封閉多肽 | 轉(zhuǎn)輪蟹通用PCR檢測試劑盒直銷 |
衣原體通用PCR試劑盒 | 肝細(xì)胞生長因子受體ELISA試劑盒 |
人膽囊收縮su/縮膽囊su八肽(CCK-8)ELISA試劑盒 | 鈣調(diào)蛋白2ELISA試劑盒 |
人15-epi-氧脂su A4(15-epi-LXA4)ELISA檢測試劑盒 | 真核翻譯延伸因子1γELISA試劑盒 |
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緊密連接蛋白3封閉多肽 | 諾氏梭狀芽孢桿菌PCR試劑盒 |
FAM177A1蛋白封閉多肽 | 馬隱秘桿菌PCR試劑盒 |
E3泛su蛋白連接meiCOP1封閉多肽 | 點(diǎn)狀古柏線蟲PCR試劑盒 |
粘蛋白17封閉多肽 | 戊型肝炎病毒(HEV)核suan檢測試劑盒 |
EB病毒核抗原-3A封閉多肽 | 七星庫道蟲PCR檢測試劑盒 |
芳香乙酰胺脫乙?；?/span>mei樣蛋白3封閉多肽 | TM4正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞貓庖疹病毒PCR試劑盒 |
腎細(xì)胞癌抗原nyren39封閉多肽 | 貓白血病病毒RT-PCR試劑盒 |
磷suan化α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin封閉多肽 | 普雷沃菌屬通用PCR試劑盒 |
牛血清白蛋白（第五組分） | 葡萄孢菌PCR試劑盒 |
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：
①進(jìn)無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。
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