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當(dāng)前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞系>>小鼠細胞系>> Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞
| 貨號 | A01X1108 | 規(guī)格 | 1×106 |
|---|---|---|---|
| 英文名稱 | Sp2/0-Ag14細胞 | 產(chǎn)品分類 | 小鼠細胞系 |
| 實驗類型 | DMEM+10%FBS+1%P/S | 報告 | （STR鼠源鑒定）報告 |
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
名稱 | Sp2/0-Ag14[SP2/0] (小鼠骨髓瘤細胞) (種屬鑒定正確) |
別稱 | SP2/0-Ag14; SP2/0-AG14; SP2/0-ag14; Sp2/O-Ag14; SP2/O-Ag14; Sp2/0-Ag-14; SP2-0-Ag14; SP2/0 Ag-14; SP-2/0-AG14; Sp 2/0-Ag 14; Sp2/0; SP2/0; Sp2/O; SP2/O; SP-2; SP2; GM03569; GM03569B; GM3569 |
種屬 | 小鼠(B細胞)，小鼠（骨髓瘤細胞） |
年齡（性別） | 不詳 |
組織來源 | 脾臟 |
生長特性 | 懸浮細胞 |
細胞形態(tài) | 淋巴母細胞樣 |
背景描述 | Sp2/0-Ag14細胞是由綿羊紅細胞免疫的BALB/c小鼠脾細胞和P3X63Ag8骨髓瘤細胞融合得到的。Sp2/0-Ag14細胞不分泌免疫球蛋白，對20μg/ml的8-氮嘌呤有抗性，對HAT比較敏感；Sp2/0-Ag14細胞可以作為細胞融合時的B細胞組分用于制備雜交瘤；鼠痘病毒陰性。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
抗原表達情況 | H-2d |
保藏機構(gòu) | ATCC; CRL-1581 ATCC;CRL-8287 DSMZ;ACC-146 ECACC;85072401 |
細胞傳代：
1. Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞試驗準備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。
5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。
7. 用培養(yǎng)液重懸細胞，細胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。
8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。
9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。
細胞轉(zhuǎn)染：
1. 轉(zhuǎn)染試劑的準備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細胞。在一個轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。
GA結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子β/GABP-β1/GABP-β2封閉多肽 | 甲型流感病毒7亞型PCR檢測試劑盒說明書 |
嗜血桿菌通用PCR試劑盒 | 肝配蛋白A受體3ELISA試劑盒 |
人酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)試劑盒 ELISA | 鈣黏蛋白23ELISA試劑盒 |
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220kDa蛋白激meiD相互作用蛋白封閉多肽 | 嗜衣原體通用PCR試劑盒 |
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粘蛋白3封閉多肽 | 豬藍耳病病毒通用型(PRRSV-U)核suan檢測試劑盒 |
EAPP蛋白封閉多肽 | 普羅威登斯菌通用PCR檢測試劑盒 |
炭疽毒su受體2封閉多肽 | Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞貓細小病毒PCR檢測試劑盒 |
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萊克多巴胺牛血清白蛋白偶聯(lián)物 | 葡萄糖苷曼氏桿菌PCR試劑盒 |
磷suan肌醇磷脂meiPLCZ1封閉多肽 | 平尾毛細線蟲PCR檢測試劑盒 |
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。
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