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大鼠ELISA試劑盒免疫吸附實(shí)驗(yàn)操作方法步驟

時(shí)間:2017/3/14閱讀:394
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大鼠ELISA試劑盒是一種用酶標(biāo)記抗原或抗體,在固相反應(yīng)板上進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)的方法。常用于檢測(cè)體液中的微量抗原和抗體,具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單、容易判斷等優(yōu)點(diǎn)。其檢測(cè)方法、注意事項(xiàng)、結(jié)果分析等詳見檢測(cè)試劑的說明書。本實(shí)驗(yàn)以雙抗體夾心法為例檢測(cè)乙型肝炎病毒表面抗
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,要求了解試?yàn)原理,試驗(yàn)方法及結(jié)果分析。
實(shí)驗(yàn)材料
1.標(biāo)本:待檢人血清
2.試劑:酶標(biāo)抗體(抗HBs)、HBsAg陽性對(duì)照血清、陰性對(duì)照、洗滌液、顯色劑A、B,終止液
3.器材:已被抗體包被的微量反應(yīng)板(48孔)、微量移液管、酶標(biāo)儀等。
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與方法
1.在微量反應(yīng)板每孔加入待檢標(biāo)本50μl,設(shè)陽性、陰性對(duì)照各2孔,每孔加入陽性(或陰性)對(duì)照各1滴,并設(shè)空白對(duì)照1孔。
2.每孔加入酶結(jié)合物1滴(空白對(duì)照除外),充分混勻,封板,置37℃孵育30分鐘。
3.棄去孔內(nèi)液體,洗滌液注滿各孔,靜置5秒,甩干,重復(fù)5次后拍干。
4.每孔加顯色劑A液、B液各1滴,充分混勻,封板,置37℃孵育15分鐘。
5.每孔加終止液1滴,充分混勻。
6.用酶標(biāo)儀讀數(shù),取波長(zhǎng)450nm,大鼠ELISA試劑盒先用空白孔校零,然后讀取各孔OD值。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果與評(píng)價(jià)
樣品OD值≥2.1陰性對(duì)照平均OD值,判斷為陽性,否則為陰性。陰性對(duì)照OD值低于0.05作0.05計(jì)算,高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算。
上海酶聯(lián)公司長(zhǎng)期提供各種種屬各種系列ELISA檢測(cè)試劑盒,用于科研檢測(cè)。種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊;標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水等等;各種標(biāo)本、種屬、具體指標(biāo)齊全。
 

 

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