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現(xiàn)在ELISA試劑盒仍在研討傍邊占有著干流位置,ELISA試劑盒的遍及使用使得試驗(yàn)更加方便、經(jīng)濟(jì)和,ELISPOT技能的長(zhǎng)處也決定了它的開(kāi)展?jié)摿?。LISPOT法來(lái)源于ELISA,相比較傳統(tǒng)的ELISA法有所突破,是定量ELISA技能的延伸和開(kāi)展。因?yàn)橛坞x的循環(huán)抗體或CK的半哀期不一樣,使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官,傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)不能切當(dāng)?shù)姆从丑w內(nèi)的抗體及CK的水平。80年代,國(guó)外的科研工作者依據(jù)ELISA技能的基本原理,建立了體外檢查特異性抗體排泄細(xì)胞和CK排泄細(xì)胞的固相酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技能(ELISPOT)。
ELISA試劑盒試驗(yàn)過(guò)程中遇到的各種疑問(wèn):
1,水質(zhì)因素:點(diǎn)復(fù)溶液驗(yàn)證,用娃哈哈礦泉水替代
2,試驗(yàn)操作因素
吸取到其它相吹干,的取液吹干
離心不*,延伸離心時(shí)刻
樣本的污染,替換樣本
乳化未處理*,溫浴(70℃)處理乳化現(xiàn)象
3,儀器試劑因素
離心管未清潔干凈,的洗刷用具
有機(jī)溶劑的影響,ELISA試劑盒做試劑空白看影響成果
4,衍生化試劑因素(長(zhǎng)時(shí)刻衍生化試劑蛻變),替換衍生化試劑
5,與曲線好壞有關(guān),,確保曲線的正常
ELISA試劑盒回收率
1.空白管陽(yáng)性高
樣本自身就是陽(yáng)性樣本,換陰性樣本做回收率
空白管在試驗(yàn)中被污染,試驗(yàn)中避免穿插污染
水質(zhì)因素用,娃哈哈礦泉水替代
2.偏 高
增加量不,的增加量
增加濃度不適合,增加適宜的濃度
取液吹干量多,的取液吹干
取到其它相層液體,取需用相吹干
復(fù)溶液未稀釋或參加量少,的稀釋復(fù)溶液
3.偏 低
增加量不,的增加量
增加濃度不適合,增加適宜的濃度
取液吹干量少,的取液吹干
復(fù)溶液稀釋過(guò)錯(cuò)或參加量多,的稀釋復(fù)溶液
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