便攜式三聚氰胺檢測(cè)儀 型號(hào):MHY-26324
產(chǎn)品描述
檢測(cè)方法
MHY-26324便攜式三聚氰胺檢測(cè)儀，利用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法用食品及飼料中三聚氰胺的定量測(cè)定。
檢測(cè)原理
MHY-26324便攜式三聚氰胺檢測(cè)儀，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法定量測(cè)定三聚氰胺殘留。利用萃取液通過(guò)均質(zhì)及振蕩的方式提取樣品中的三聚氰胺進(jìn)行免疫測(cè)定。先將三聚氰胺酶標(biāo)記物，樣品萃取物及標(biāo)準(zhǔn)加入到已經(jīng)包被有三聚氰胺抗體的微孔中開(kāi)始反應(yīng)。在30分鐘的孵育過(guò)程中，樣品萃取物中的三聚氰胺與三聚氰胺酶標(biāo)記物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合微孔中的三聚氰胺抗體，孵育30分鐘后洗掉小孔中所有沒(méi)有結(jié)合的三聚氰胺及三聚氰胺酶標(biāo)記物。在用去離子水清洗結(jié)束后，每孔中加入清澈的底物溶液，結(jié)合的酶標(biāo)記物將無(wú)色的底物轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的物質(zhì)。孵育30分鐘后停止此反應(yīng)，根據(jù)各孔顏色深淺進(jìn)行數(shù)據(jù)讀取。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的顏色得出樣品中三聚氰胺的的濃度值。
實(shí)驗(yàn)所需設(shè)備及材料
三聚氰胺檢測(cè)試劑盒（目前常用進(jìn)口試劑有美國(guó)Abraxis公司和美國(guó)Beacon公司的）
318C酶標(biāo)儀一臺(tái)或MHY-26324便攜式三聚氰胺檢測(cè)儀（配有450nm濾光片）
1－5ml可調(diào)移液器
100－1000ul可調(diào)移液器.
20－200ul可調(diào)移液器.
蒸餾水或去離子水..
可吸取50ul的移液器及吸頭.
可吸取50ul和100ul的八道移液器及吸頭.
吸水紙或相當(dāng)?shù)奈牧?
450nm的酶標(biāo)儀.
計(jì)時(shí)器.
洗瓶
混旋器.
20mM PBS： 0.62g NaH2PO4-2H2O+5.73gNa2HPO4-12H2O+9gNaCl ,蒸餾水定容至1000ml.
注意事項(xiàng)
配套使用試劑，不要同其它公司的產(chǎn)品混用，不要將不同批次的產(chǎn)品混用。
樣品稀釋或含有雜質(zhì)很可能對(duì)結(jié)果的準(zhǔn)確性有影響。
不要使用過(guò)期的產(chǎn)品。
使用之前將所有試劑回升至室溫，但不要放置超過(guò)24小時(shí)。
三聚氰胺屬于有毒性的化學(xué)品，請(qǐng)小心處理。
停止液是1N鹽酸，避免接觸皮膚。
樣品制備（以美國(guó)Beacon試劑為例）
濕的寵物食品萃取方法（稀釋倍數(shù)：100）
均質(zhì)樣品至布丁狀。
稱取2g樣品加入10mL 60%甲醇/水溶液，并劇烈振蕩。
超聲萃取1分鐘。
漩渦混合1分鐘，然后靜置5分鐘，使樣品分層。
3000 g 室溫離心5分鐘。
用玻璃纖維濾紙過(guò)濾上清液，并將萃取液收集于一干凈試管中。
用樣品稀釋液將濾液20倍稀釋（如：0.1mL濾液+1.9mL 10%甲醇/20mMPBS）
移取150 ul 進(jìn)行分析。
注意：用此方法測(cè)定了8個(gè)添加有15ppm三聚氰胺的貓糧（非要求召回），回收率范圍為75%-117%。
本方法只可作為樣品篩選方法，不可作為終確認(rèn)方法。
小麥面筋蛋白萃取方法：（稀釋倍數(shù)：500）
1.均質(zhì)或混勻小麥面筋蛋白樣品。
2.稱取0.2g均質(zhì)好的樣品加入10mL 酸化的60%甲醇/水溶液(1mL 1N HCl/ 100mL 60%甲醇/水)。
3.漩渦混合并超聲萃取，使樣品溶解（確保樣品中沒(méi)有結(jié)塊）。
4.用樣品稀釋液稀釋萃取液按照1:10比例。（0.5mL+4.5mL 10%MeOH/20 mM PBS）。
5.10000轉(zhuǎn)/分離心上清液10分鐘。
6.用G6玻璃纖維濾紙過(guò)濾上清液，并將萃取液收集于一干凈試管中。
7.移取150 ul 進(jìn)行分析。
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