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膠體金測試真菌毒素原理及優(yōu)點

時間:2024/9/30閱讀:214
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  1. 膠體金的特性基礎

    • 膠體金是由氯金酸 (HAuCl?) 在還原劑作用下,聚合成一定大小的金顆粒,由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài),故稱膠體金。膠體金顆粒具有高電子密度的特性,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒。

    • 它能與生物大分子(如蛋白質等)結合,且結合后不會影響生物大分子的生物活性。

  2. 免疫反應原理

    • 當樣品中存在真菌毒素時,真菌毒素會與膠體金 - 抗體復合物中的抗體競爭結合檢測線上的捕獲試劑。由于樣品中的真菌毒素與抗體的親和力,會導致膠體金 - 抗體復合物不能有效地被檢測線上的捕獲試劑捕獲,從而使檢測線顏色變淺或者不顯色,這表示陽性結果。

    • 同時,在質控線(通常是固定抗抗體或其他質控試劑的區(qū)域),無論樣品中是否有真菌毒素,膠體金 - 抗體復合物中的抗體或者剩余的膠體金 - 抗體復合物會與質控線上的試劑結合,顯示出顏色,以表明試紙條檢測過程正常。

    • 抗原 - 抗體特異性結合:在膠體金檢測真菌毒素的體系中,首先會有針對真菌毒素的特異性抗體。真菌毒素作為抗原,當樣品中含有真菌毒素時,毒素(抗原)會與抗體發(fā)生特異性結合。

    • 膠體金標記物的作用:將膠體金與特異性抗體結合形成膠體金 - 抗體復合物。在檢測時,如果樣品中沒有真菌毒素,膠體金 - 抗體復合物可以在檢測區(qū)域(如試紙條的檢測線)正常移動并被捕獲試劑(如固定在檢測線上的抗抗體或抗原類似物)捕獲,顯示出特定的顏色(如紅色),表示陰性結果。

    • 競爭反應機制(以免疫層析試紙條為例)

    當樣品中存在真菌毒素時,真菌毒素會與膠體金 - 抗體復合物中的抗體競爭結合檢測線上的捕獲試劑。由于樣品中的真菌毒素與抗體 的親         和力,會導致膠體金 - 抗體復合物不能有效地被檢測線上的捕獲試劑捕獲,從而使檢測線顏色變淺或者不顯色,這表示陽性結果

    • 同時,在質控線(通常是固定抗抗體或其他質控試劑的區(qū)域),無論樣品中是否有真菌毒素,膠體金 - 抗體復合物中的抗體或者剩余的膠體金 - 抗體復合物會與質控線上的試劑結合,顯示出顏色,以表明試紙條檢測過程正常


膠體金法的優(yōu)點

  1. 操作簡便

    • 膠體金免疫層析法不需要復雜的儀器設備,對操作人員的專業(yè)要求相對較低。例如,檢測過程可能僅需將樣品滴加到試紙條上,在數(shù)分鐘到數(shù)十分鐘內即可觀察結果,無需特殊培訓就能進行操作。

  2. 快速檢測

    • 能夠在較短時間內得到檢測結果。一般來說,從加樣開始到得出結果,整個過程可以在 10 - 30 分鐘內完成,這對于現(xiàn)場快速篩查、即時診斷等場景非常適用,如在農產(chǎn)品收購現(xiàn)場快速檢測真菌毒素等有害物質。

  3. 成本較低

    • 膠體金免疫層析法的試劑制備相對簡單,不需要昂貴的儀器設備進行檢測,試紙條等檢測材料的生產(chǎn)成本也相對較低。這使得該方法在大規(guī)模篩查、基層檢測單位以及一些經(jīng)濟欠發(fā)達地區(qū)的應用中具有成本優(yōu)勢。

  4. 穩(wěn)定性好

    • 膠體金標記物具有較好的穩(wěn)定性,可以在常溫下保存一定時間。例如,部分膠體金免疫層析試紙條在常溫下能夠保存數(shù)月甚至一年以上,并且仍能保持較好的檢測性能,減少了對冷鏈等特殊保存條件的依賴。

  5. 直觀結果

    • 檢測結果以試紙條上的顏色變化來顯示,直觀易懂。例如,在檢測線上出現(xiàn)特定顏色條帶表示陰性結果,顏色條帶缺失或變淺表示陽性結果,即使是非專業(yè)人員也能夠較為容易地判斷結果。

  6. 特異性強

    • 基于抗原 - 抗體特異性結合的原理,對目標物質具有高度特異性。只要抗體的特異性良好,就能夠準確地識別目標真菌毒素、病原體或其他生物標志物等,減少假陽性和假陰性結果的出現(xiàn)。



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