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當(dāng)前位置:藍(lán)景科信河北生物科技有限公司>>試劑標(biāo)物>>常用實(shí)驗(yàn)室試劑>> DT4032/48/64/96組織 DNA提取試劑盒
一、樣本預(yù)處理:1.取5~10 mg動(dòng)物組織,在研缽中加入液氮充分碾磨。2.將研磨好的粉末迅速轉(zhuǎn)移到預(yù)先裝有300 μL裂解液1和20 μL蛋白酶K的離心管中.注:如使用組織研磨儀鋼珠研磨,可在研磨后將300 μL裂解液1和20 μL蛋白酶K加入到研磨管中。3.在65°C下,震蕩(900~1200 rpm)孵育10min。。注: 樣本消化完成后,如果有組織碎片,建議12,000 rpm離心1 min去除殘留雜質(zhì)。注:如果需要去除RNA,加入5-10 μL RNA酶,室溫放置10 min。二、32通道全自動(dòng)提取儀上機(jī)提取流程:1.轉(zhuǎn)移300 μL上清至96孔樣品板中裝有結(jié)合液2的第1/7列。2.將96孔板置于核酸提取儀中。3.將磁棒套推入磁棒套卡槽內(nèi)。4.啟動(dòng)“組織DNA提取"程序,開始提取。5.程序結(jié)束后,核酸位于第6/12列的洗脫液7中,可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。三、Chemagic 360自動(dòng)化流程預(yù)處理:1.上機(jī)前應(yīng)先檢查緩沖液容器中是否都含有足夠的緩沖液。2.點(diǎn)擊應(yīng)用程序,啟動(dòng)后,等待機(jī)器自檢。3.自檢完成后,選擇程序“prime manifolds H96 all 360 V150116.che",開始預(yù)填充管路。上機(jī)提?。?.轉(zhuǎn)移300 μL上清至96孔板中。2.板位1:在磁棒套架上放入磁棒套。3.板位2:放入裝有上清液的96孔板,加入500 μL結(jié)合液2。4.板位3:在96孔板中加入700 μL洗滌液3和20 μL磁珠懸浮液。5.板位4:在96孔板中加入700 μL洗滌液4。6.板位5:在96孔板中加入700 μL洗滌液5。7.板位6:在96孔板中加入700 μL洗滌液6。8.板位7:在96孔板中加入100 µL洗脫液7。9.選擇程序“chemagic-B DNA Tissue 360 H96 drying prefilling VD241225",然后選擇需要上機(jī)的列數(shù),點(diǎn)擊[Start]。10.提取完成后,核酸位于洗脫液板內(nèi),可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)或-80℃以下儲(chǔ)存。
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