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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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BMP抑制劑(DMH-1)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-24 15:37:24瀏覽次數(shù):452次

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貨號(hào) FS-X11086
BMP抑制劑(DMH-1)正在熱銷的產(chǎn)品:APEX1/Ref-1 /FITC 熒光標(biāo)記氧化還原因子1抗體IgG無(wú)水碳鈉 GR,≥99.8%
cx無(wú)水碳鈉 PT
API5/AAC11 /FITC 熒光標(biāo)記凋亡抑制因子5抗體IgG無(wú)水碳鈉 SP
APNG/MPG/FITC 熒光標(biāo)記N-DNA糖化IgG無(wú)水碳鈉 99.99% metals basis
apoA1/FITC 熒光標(biāo)記載脂蛋白A1抗

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

中文名稱:BMP抑制劑(DMH-1)

英文名稱:DMH-1

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

貨號(hào):FS-X11086

產(chǎn)品介紹:

DMH-1是一種有效的,具有選擇性的BMP抑制劑,對(duì)ALK1/ALK2/ALK3/ALK6的IC50值分別為27/107.9/<5/47.6nM。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號(hào):1206711-16-1

純度:99.65%

分子量:380.44

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

suan化DNA拓普西異構(gòu)meiⅡ抗體 phospho-TOPO II Alpha (Ser16)

suan化非受體型酪氨suan蛋白激meiTnk1抗體 Phospho-TNK1 (Tyr277)

環(huán)腺suan應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 TORC1

suan化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 Phospho-Torc1 (Ser151)

CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體 TORC2

腫瘤壞死因子β抗體(TNFβ) TNF beta

轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體 TCF7L2

血栓suB2(一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因)抗體 TBX2

tRNA剪接內(nèi)切mei2抗體 TSEN2

腫瘤蛋白D53抗體 D53

睪特異絲氨suan/蘇氨suan激mei6抗體 TSSK6

腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子7抗體 TRAF7
BMP抑制劑(DMH-1)黃暗青霉 野甘草屬

季也蒙畢赤酵母 Sanshodiol

酮叢毛單胞 Richenoic acid

黃曲霉 3-鄰(6-脫氧-beta-D-吡喃葡萄糖) 28-O-beta-D-吡喃葡萄糖雞納酯

白色短波單胞 前五味子 B

粉紅單端孢霉 Porson

大腸埃希氏 苦木西堿 S

球毛殼 苦木西堿 I

傷口埃希 Phaseollidin hydrate

莖生擬莖點(diǎn)霉 Panaxyne

淺紫灰鏈霉產(chǎn)色變種 矮陀陀堿 A

許旺酵母屬 Orientanol A

枯草芽孢桿 金粉蕨辛

丁香直絲鏈霉 Olean-12-ene-3,24-diol

和緩艾美爾球蟲(LZ株) Octacosyl (E)-ferulate
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

 


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