參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：甲型流感病毒核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品貨號：FS-P9630
產(chǎn)品分類：熒光PCR法
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟 
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此，實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時，剛剛進入真正的指數(shù)擴增期（對數(shù)期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現(xiàn)性，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確，重現(xiàn)性*定量方法，已得到的*，廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開，分別測定熒光強度，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內(nèi)標和引物，內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標與靶模板的長度不同，二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物，擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合，再加入抗di高辛或生物素酶標抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內(nèi)標，作出標準曲線，也可實現(xiàn)定量檢測目的。

人Ⅸ型膠原蛋白ELISA檢測試劑盒 Ⅸ-C Collagen Type Ⅸ 3ng/mL~96ng/mL 0.1
人adropinELISA檢測試劑盒 AD adropin 12.5pg/mL~400pg/mL 1
人AKT蛋白ELISA檢測試劑盒 AKT AKT 1μmol/L~32μmol/L 0.1
人AP2A2ELISA檢測試劑盒 AP2A2 Adaptor-Related Protein Complex 2, alpha 2 Subunit 1.5ng/mL~48ng/mL 0.1
人脂肪炎癥因子ELISA檢測試劑盒 Apelin Apelin 2.5ng/mL~80ng/mL 0.1
人apelin 12ELISA檢測試劑盒 AP12 apelin 12 0.25ng/mL~8ng/mL 0.1
人apelin 13ELISA檢測試劑盒 AP13 apelin 13 0.25ng/mL~8ng/mL 0.1
人apelin 36ELISA檢測試劑盒 AP36 apelin 36 0.25ng/mL~8ng/mL 0.1
人Argonaut-2蛋白ELISA檢測試劑盒 Ago-2 Argonaut2 6.25ng/mL~200ng/mL 1
人ATP酶ELISA檢測試劑盒 ATPase ATPase 0.5U/mL~16U/mL 0.1
人ATP依賴的RNA解旋酶AELISA檢測試劑盒 DHX9 DHX9 0.5ng/mL~16ng/mL 0.1
人B7-1ELISA檢測試劑盒 CD80 B7-1 50pg/mL~1600pg/mL 10
人B7同系物6ELISA檢測試劑盒 B7-H6 B7-H6 1ng/mL~32ng/mL 0.1
人B7同源體1ELISA檢測試劑盒 B7-H1 B7-H1 31.25pg/mL~1000pg/mL 1
人B7同源體2ELISA檢測試劑盒 B7-H2 B7-H2 0.25ng/mL~8ng/mL 0.1
人B7同源體3ELISA檢測試劑盒 B7-H3 B7-H3 1ng/mL~32ng/mL 0.1
人Bcl-2相關(guān)X蛋白ELISA檢測試劑盒 BAX Bcl-2 associated X protein 0.25ng/mL~8ng/mL 0.1
人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導蛋白ELISA檢測試劑盒 Bid BH3 interacting domain death agonist 1.5pg/mL~48pg/mL 0.1
人Bmi-1基因ELISA檢測試劑盒 BMI-1 B cell-specific MLV inte-gration site-1 0.25ng/mL~8ng/mL 0.1

Alpha-Synuclein 核突觸蛋白抗體
beta-Actin (Loading Control) β-肌動蛋白/β-Actin 抗體（內(nèi)參抗體）
beta-Amyloid 1-42 (CT) β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體
beta Amyloid 1-16 β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體
beta Amyloid 1-28 β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體
ARIP2a 激活素受體2A抗體
Aquaporin 5 水通道蛋白5抗體
beta Amyloid 1-40 β淀粉樣肽（1-40）抗體
beta Amyloid 1-42 β淀粉樣肽（1-42）抗體
APOA1 載脂蛋白A1抗體
Beta-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗體
Ankyrin B 錨定蛋白B抗體
ATP7A 銅轉(zhuǎn)運蛋白質(zhì)α鏈抗體
Amphetamine(2A3F) 單克隆/抗體
ASMTL ASMTL蛋白抗體
TRA16 激素受體相關(guān)蛋白16抗體
甲型流感病毒核酸檢測試劑盒beta-Amyloid 1-40 (CT) β淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗體
ASB13 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族13抗體
beta Amyloid 31-35 β淀粉樣肽（31-35)/Aβ 31-35 抗體
beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉樣肽 1-40（C端）抗體
Beta arrestin 2 β-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2/β-arrestin抗體
Anthrax 炭疽桿菌抗體
ACD 腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體
Angiotensin II type 1A receptor 血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體
ABI1 ABI1/SSH3BP1蛋白抗體
PCR的反應條件：
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小，設(shè)定25～30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少，擴增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時，每kbp大體可設(shè)定30秒～1分鐘；當溫度設(shè)定在68℃以下時, 時間設(shè)定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產(chǎn)物；Anneal溫度太低時，容易發(fā)生非特異性反應。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成；而Extension時間太長時，會出現(xiàn)Smear。