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細(xì)胞凋亡陽性對照試劑盒

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更新時間:2022-05-09 09:14:35瀏覽次數(shù):850次

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細(xì)胞凋亡陽性對照試劑盒

Apoptosis Inducers Kit

200次

FS-X9524

產(chǎn)品介紹:

本試劑盒含有兩種不同的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)試劑,試劑A和試劑B。細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)試劑A(Apopida)和試劑B(Apobid)分別可以誘導(dǎo)Hela、HEK293、CHO、COS等常見細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。

由于細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)具有細(xì)胞特異性,細(xì)胞凋亡的機(jī)制也具有一定的細(xì)胞特異性,盡管細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)試劑A和試劑B可以誘導(dǎo)常見的一些細(xì)胞的細(xì)胞凋亡,但是我們無法保證這兩種試劑可以誘導(dǎo)任何一種細(xì)胞發(fā)生凋亡。細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)試劑A和試劑B相互補(bǔ)充,可以誘導(dǎo)更多種類的細(xì)胞產(chǎn)生凋亡。本試劑盒至少可用于檢測200個樣品。

試劑盒組份:

細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)試劑A——————200μl

細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)試劑B——————200μl

注意事項(xiàng):對于不同的細(xì)胞,需要摸索細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)試劑的不同濃度和誘導(dǎo)時間。

儲存條件:-20℃,有效期一年。

注意事項(xiàng):

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

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操作步驟:

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。

③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 


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