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| 貨號 | FS-X10861 |
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產(chǎn)品介紹:
RG2833是一種大腦滲透的HDAC抑制劑，抑制HDAC1和HDAC3的活性，IC50值分別為60nM和50nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1215493-56-3 別名：RGFP109 純度：99.43% 分子量：339.43 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱：HDAC抑制劑(RG2833)
英文名稱：RG2833
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10861
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
芽胞桿菌小鼠α半乳糖基抗原Anti-RAB29 Antibody人蛋白S(Protein S)
郝氏青霉大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199Anti-RAB2B Antibody人蛋白S(Protein S)
福山假絲酵母人幽門螺旋桿菌IgMAnti-RAB31 Antibody人可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)
蟲草大鼠血紅氧合1Anti-RAB29 Antibody人可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)
惡臭假單胞菌小鼠β基己糖AAnti-RAB33A Antibody人CCAAT增強子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)
人相關(guān)蛋白AAnti-RAB35 Antibody人CCAAT增強子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)
頂頭孢霉大鼠磷脂A2Anti-RAB34 Antibody人CCAAT增強子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)
白絨紅蛋巢菌小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白AAnti-RAB37 Antibody人CCAAT增強子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)
焦曲霉小鼠克拉拉蛋白Anti-RAB38 Antibody人CCAAT增強子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)
總狀共頭霉大鼠組織因子途徑抑制物Anti-RAB40B Antibody人CCAAT增強子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)
耐輻射奇球菌人胃抑Anti-RAB3GAP2 Antibody人2,3-二磷甘油(2,3-DPG)
散囊菌小鼠β半乳糖Anti-RAB3GAP2 Antibody人2,3-二磷甘油(2,3-DPG)
煙曲霉大鼠水通道蛋白5Anti-RAB3GAP1 Antibody人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)
釀酒酵母人胃泌釋放多肽Anti-RAB3IP Antibody人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)
光滑青霉人胃泌釋放肽前體Anti-RAB41 Antibody人Na+/H+交換體3(NHE3)
茯苓小鼠腎上腺Anti-RAB40B Antibody人Na+/H+交換體3(NHE3)
跨膜蛋白6B抗體美國大鐘菇人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞
腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白3相互作用蛋白1抗體青黃褐硬皮馬勃pCDNA3.1-his-TNFRSF4
瞬時受體電位通道蛋白4抗體地星TNFRSF4人源基因
神經(jīng)元蛋白22抗體褐疣柄牛肝菌人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
HDAC抑制劑(RG2833)粉擬青霉 (S)-(-)-2-甲基-1-丁三葉因子
黑曲霉 3%NaCl阿拉伯糖主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類
果蔬汁 莠滅凈、嘧霉、乙酰磷、 多靈、死蜱、菊酯 3%NaCl胰胨水中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白
網(wǎng)狀鐮孢 3%NaCl甘露氨肽N
枯草芽孢桿枯草亞種 9-溴蒽二肽基肽Ⅳ
*松乳菇 3%NaCl蔗糖γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽
蟲花棒束孢 3%NaCl阿拉伯糖氨肽A
乳乳球乳亞種 3%NaCl乳糖尿氮
華特拉根瘤 [1,3-雙(二苯基膦)烷]二化鎳(II)腸三葉因子
枯草芽孢桿 %NaCl胰胨水Na-K-ATP
Rhizobium miluonense 7%NaCl胰胨水層粘連蛋白
球座尾孢 無鹽胰胨水Ⅳ型膠原
腸膜明串珠 麥芽糖維生B12
釀酒酵母 1-溴-2,3,5,6-四氟苯口蹄疫病非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC抗體
柄籃狀 葡萄糖二肽基肽Ⅳ
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