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當(dāng)前位置：上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>輔酶Ⅱ系列>> ICDHc胞漿異檸檬酸脫氫酶紫外分光光度法
| 貨號 | FS-01S63245 |
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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱：ICDHc胞漿異檸檬酸脫氫酶紫外分光光度法
規(guī)格：50管/48樣
檢測方法：紫外分光光度法
貨號：FS-01S63245
商品介紹：
測定意義 ICDHc（EC 1.1.1.42）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸，同時(shí)還原NADP+生成NADPH。ICDHc是細(xì)胞質(zhì)中除了磷酸戊糖途徑外又一種NADPH重要來源，在逆境中該酶活性通常會發(fā)生顯著變化。 測定原理： 利用ICDHc催化NADP+還原成NADPH反應(yīng)，在340 nm下測定NADPH濃度的增加。 所需的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。 7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 |
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)胞或組織樣品的制備： 培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。 2、血清（漿）樣品：直接檢測。 |
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
豬叉頭框蛋白O2(FOXO2)聯(lián)免疫試劑盒枯草芽孢桿LCP1 Antibody
豬Nesfatin 1蛋白 (NES1)聯(lián)免疫試劑盒 黏著玫瑰變色hnRNP Q/R Antibody
豬相關(guān)漿蛋白A(PAPPA)聯(lián)免疫試劑盒球孢白僵FoxA1/HNF3α (E7E8W) Rabbit mAb
豬普通急性白血病抗原(CALLA)聯(lián)免疫試劑盒 球孢白僵SimpleChIP® Human HMOX1 Promoter Primers
豬半乳糖苷β(GLβ)聯(lián)免疫試劑盒雅致放射毛霉Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
豬趨化樣因子超家族成員4(CKLFSF4)聯(lián)免疫試劑盒大腸埃希NME1/NDKA (D14H1) Rabbit mAb
豬蛋白激C(PKC)聯(lián)免疫試劑盒銅綠假單胞EGF Receptor (L858R Mutant Specific) (43B2) Rabbit mAb (Biotinylated)
豬神經(jīng)營養(yǎng)性酪激2型受體(NTRK2)聯(lián)免疫試劑盒Enterobacter cowanii Inoue et al. PathScan® Total MUC1 Sandwich ELISA Kit
豬肝配蛋白A4 (EFNA4)聯(lián)免疫試劑盒克魯弗酵母SimpleChIP® Mouse Ccdc57 Intron 5 Primers
豬成纖維生長因子9(FGF9)聯(lián)免疫試劑盒熱帶假絲酵母Phospho-NMDA Receptor 2B (GluN2B) (Ser1284) Antibody
豬骨髓前體抑制因子1(MPIF-1/CCL23)聯(lián)免疫試劑盒蠟狀芽孢桿HDAC1 (10E2) Mouse mAb
豬脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)聯(lián)免疫試劑盒 短密青霉HDAC1 (10E2) Mouse mAb
豬腸脂肪結(jié)合蛋白(IFABP)聯(lián)免疫試劑盒黃曲霉SHOC2 (D7N1A) Rabbit mAb
豬蛋白(NPHN)聯(lián)免疫試劑盒香氣紅冬孢鎖擲孢酵母Histone H2A.X (D17A3) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
豬胎球蛋白A(FETUA)聯(lián)免疫試劑盒 谷棒桿Ⅰ型SirT7 (D3K5A) Rabbit mAb
ICDHc胞漿異檸檬酸脫氫酶紫外分光光度法周期M2抗體Human ADAMTS7(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 7) ELISA Kit人肺癌標(biāo)志物DR-70（DR-70TM）ELISA試劑盒,DR-70TM ELISA kit
周期T2抗體Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA Kit人乙酰肝（HPA）ELISA試劑盒,HPA ELISA kit
周期K抗體Human TNC(Tenascin) ELISA Kit人抗存活抗體/生存蛋白（Surv）ELISA試劑盒,Surv ELISA kit
抗肽CAMP抗體Human IL36A(Interleukin-36 alpha) ELISA Kit人抗肌內(nèi)膜抗體IgA（EMA IgA）ELISA試劑盒,EMA IgA ELISA
5號染色體開放閱讀框4抗體Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人衣原體蛋白樣活性因子（CPAF）ELISA試劑盒, CPAF ELISA
4號染色體開放閱讀框44抗體Human MAPT(Microtubule-associated protein tau) ELISA Kit人流感病抗體IgG（FLU）ELISA試劑盒,FLU ELISA
4號染色體開放閱讀框33抗體Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人雌受體（ER）ELISA試劑盒,ER ELISA
4號染色體開放閱讀框42抗體Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人3-羥基-3-甲基戊二酰A合1（HMGCS1）ELISA試劑盒,HMGCS1 ELISA
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