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當(dāng)前位置：上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>抑制劑激活劑>> KIT，CSF1R和FLT3抑制劑
| 貨號 | FS-X10307 |
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產(chǎn)品介紹:
英文名稱：Pexidartinib 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Pexidartinib是KIT，CSF1R和FLT3的抑制劑，能夠作用于Fms和Kit，IC50分別為28和16nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1029044-16-3 別名：PLX-3397 純度：98.86% 分子量：417.81 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱：KIT，CSF1R和FLT3抑制劑
英文名稱：Pexidartinib
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10307
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
草色串孢溶菌抗體Human IFITM3(Interferon-induced transmembrane protein 3) 胃抑(GIP)
多座蟲草*LAD1蛋白抗體Human PIAS1 胃內(nèi)因子(GIF)
黑木耳胸腺生成LAP2抗體Human PIAS2 胃泌抗體(GCA)
黑曲霉富含亮重復(fù)蛋白6抗體Human PIAS3 胃泌釋放肽前體(ProGRP)
地下節(jié)桿菌低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白12抗體（抑制腫瘤蛋白7）Human PIAS4 胃泌釋放多肽(GRP)
解淀粉芽孢桿菌磷化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體Human PHLDA1 胃泌(Gastrin)
枯草芽孢桿菌低密度脂蛋白受體抗體Human PHLPP 胃泌(GAS)
瘦抗體Human PHLDA2 胃動(dòng)(MTL)
小鏈霉菌腫瘤自身抗原LMO4抗體Human PHLPPL 胃動(dòng)蛋白2(GKN2)
繩生毛殼淋巴特異性蛋白酪激抗體Human LRP8(Low-density lipoprotein receptor-related protein 8) 胃蛋白原C(PG-C)
釀酒酵母白免疫球蛋白樣受體8抗體Human PGRMC2 胃蛋白原A(PG-A)
黑木耳(186)白三烯B4受體1抗體Human PHKA2 胃蛋白(PP)
巨大芽孢桿菌白免疫球蛋白樣受體6抗體Human PHACTR4 胃蛋白(PG)
Candida淋巴活化基因-3抗體Human PHACTR1 胃蛋白(GT)
變平滑假絲酵母白相關(guān)免疫球蛋白樣受體1抗體Human PHAX 未甲基化寡聚脫氧核(CpG-ODN)
柴油食烷菌白分化抗原CD207抗體Human MUSK(Muscle, skeletal receptor tyrosine-protein kinase) 尾肢同源蛋白2(PYGO2/PP7910)
Staphylococcus│aureus 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)(T)土貝母
嘴突凸臍蠕孢Exserohilum│rostratum 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)柴胡皂B2
葉氏假交替單胞菌Pseudoalteromonas│elyakovii 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)柴胡皂B1
KIT，CSF1R和FLT3抑制劑腐皮殼 咪唑并[1,2-A]吡啶-5-氨基雷帕霉靶蛋白C1
側(cè)耳 2,4-二苯丁酮周期依賴性激抑制因子2A
巴博乳桿 6-羥基-5-硝基煙胰島樣生長因子結(jié)合蛋白4
ATCC 10224 3-氨基-5-甲基-6-噠酪
大腸埃希 2-氨基噻唑-5-甲甲酯周期依賴性激抑制劑P16INK4a
香茅彎孢 頭孢替安鹽鹽腎母過度表達(dá)基因
蘇云金芽胞桿蠟螟亞種 3H-1,2-苯并二硫-3-酮-1,1-二氧化物糖原合激3α
分枝節(jié)桿 3--4-溴甲苯磷化糖原合成激3α
鼠傷門氏 TA97a 4-溴間苯二抗性磷2b
黃桿 2,4,7-三喹唑啉衰老相關(guān)β-半乳糖
墻壁圣格奧爾根 2--5-氟甲苯12羥二十烷四烯
枯草芽孢桿 異喹啉-3-甲5羥二十烷四烯
鐘器腐霉 5-巰基-1,2,3,4-四氮唑-1-甲基磺雙鈉鹽A型巴氏桿抗體
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