Smo receptor激動(dòng)劑(SAG)-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-X10494

中文名稱(chēng)：Smo receptor激動(dòng)劑(SAG)

英文名稱(chēng)：SAG

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg

貨號(hào)：FS-X10494

產(chǎn)品介紹:

英文名稱(chēng)：SAG

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg

SAG是一種有效的Smo receptor激動(dòng)劑，能夠活化Hedgehog信號(hào)通路，Kd值為59nM。

注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號(hào)：912545-86-9

純度：99.61%

分子量：490.06

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

ATCC 102245-羥色轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Anti-GALE Antibody小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)

大腸埃希菌鏈霉抗體Anti-GALT Antibody小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)

香茅彎孢磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體Anti-GALNS Antibody小根蛋白(ROLT)

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種DNA結(jié)合蛋白2抗體Anti-GAP43 Antibody小泛相關(guān)修飾蛋白2(SUMO2)

分枝節(jié)桿菌轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM2抗體Anti-GAP43 Antibody小白蛋白(PVALB)

鼠傷門(mén)氏菌 TA97a膜內(nèi)蛋白4抗體Anti-GAP43 Antibody硝基酪(NT)

黃桿菌絲裂原活化蛋白激磷p38γ抗體Anti-GAP43 Antibody腺磷核糖轉(zhuǎn)移(APRT)

墻壁圣格奧爾根菌磷化絲裂原活化蛋白激磷p38γ抗體Anti-GATA2 Antibody腺瘤息肉病大腸桿菌蛋白(APC)

枯草芽孢桿菌尿轉(zhuǎn)運(yùn)型糖蛋白A2抗體Anti-GAS6 Antibody腺激8(AK8)

鐘器腐霉可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3A1抗體Anti-GATA1 Antibody腺激7(AK7)

膿腫分枝桿菌含氧轉(zhuǎn)移2A抗體Anti-GATA2 Antibody腺激5(AK5)

小青霉腸炎沙門(mén)氏菌抗體Anti-GATA4 Antibody腺激4(AK4)

藍(lán)綠青霉SEC14樣蛋白2抗體Anti-GATA3 Antibody腺激3(AK3)

佛雷德里克斯堡假單胞菌跨膜蛋白SEMA4D抗體Anti-GATA5 Antibody腺激2(AK2)

Sphingopyxis rigui 抑癌蛋白5抗體Anti-GATA5 Antibody腺激1(AK1)

多座蟲(chóng)草*基底膜相關(guān)軟骨蛋白多糖抗體Anti-GATA3 Antibody腺環(huán)化關(guān)聯(lián)蛋白2(CAP2)

絲蛋白抑制劑A11抗體銀耳人呼吸道上皮細(xì)胞

神經(jīng)突出相關(guān)蛋白Slitrk1抗體朗比可假絲酵母人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST抗體鶴羽田戴爾福特菌人肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

24脫氫膽固還原抗體紫紅曲人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞
Smo receptor激動(dòng)劑(SAG)黃銹傘納氮化鋁皮質(zhì)酮;腎上腺酮

赭色擲孢酵母 Boc-L-谷-1-叔丁酯糖皮質(zhì)

竹針孢座囊 4--L-苯Ca-ATP

釀酒酵母 L-4-溴苯Na-K-ATP

耐冷冷桿 5--2-羧膽固

棲稻黃色單胞 N-甲基二烯基活化B

釀酒酵母 4-(溴甲基)甲酯酪蛋白

無(wú)環(huán)田頭菇乙鎂腫瘤壞死因子α

煙色擬盤(pán)多毛孢 3,5-二芐氧基苯甲膽固7α羥化

球孢白僵 2,3,5-三氟苯甲固膽固轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白

八孢裂殖酵母雙(p-甲苯基)氧化磷低密度脂蛋白

弗雷德里克斯堡假單胞 5-氟-2-三氟甲唾液

華根霉 3-溴-1,8-萘二甲酐蛋白A

多黏類(lèi)芽孢桿 (1R,2R,5R)-(+)-2-羥基-3-蒎酮乳

弗蘭克氏 2 - 二苯基膦-2' - （N組，n -二基） - 聯(lián)苯尿氮

国产精品成人网站,日韩视频二区,亚洲成人手机电影,怡红院国产

Smo receptor激動(dòng)劑(SAG) 返回列表頁(yè)

儀表網(wǎng)

會(huì)員登錄

收藏該商鋪

提示