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RSK2抑制劑(Pluripotin)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-24 15:31:14瀏覽次數(shù):224次

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貨號 FS-X11080
RSK2抑制劑(Pluripotin)正在熱銷的產(chǎn)品:AKT2/FITC 熒光標(biāo)記蛋白激B2抗體IgG無水硫氫鈉 CP
phospho-Akt/FITC 熒光標(biāo)記抗化蛋白激B抗體IgG鈉 AR, ≥99.0%
CEA/Gold 膠體金標(biāo)記癌胚抗原抗體IgG鈉 CP, ≥98.0%
Aldolase A/FITC 熒光標(biāo)記縮A抗體IgG鈉 ACS, ≥99.0%
ALK/CD246Ag /F

產(chǎn)品介紹:

Pluripotin(SC-1)抑制RSK2活性,EC50值為2.5±1.8μM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:839707-37-8

別名:SC1

純度:98.0%

分子量:550.54

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

中文名稱:RSK2抑制劑(Pluripotin)

英文名稱:Pluripotin

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

貨號:FS-X11080

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

跨膜蛋白6B抗體 TMEM6B

血小板源性生長因子A相關(guān)蛋白2抗體 TUSC2

微管相關(guān)蛋白Tau421抗體 Tau421

瞬時受體電位通道蛋白4抗體 CABP4

腫瘤/睪抗原44抗體 TPTE

乳腺癌、胃癌抗原GA55抗體 TACC1

轉(zhuǎn)化生長因子β調(diào)節(jié)蛋白4抗體 TBRG4

酪氨suan蛋白激mei3抗體 TYK3

瞬時受體電位離子通道蛋白1抗體(M亞家族) TRPM1

瞬時受體電位離子通道蛋白6抗體(M亞家族) TRPM6

suan化酪氨suan蛋白激mei3抗體 phospho-TYK3(Tyr402)

跨膜蛋白2樣蛋白抗體 TMEM2L
RSK2抑制劑(Pluripotin)根瘤 5,8,4'-Trihydroxy-7-methoxyflavo

球孢白僵 5,5'-Dimethoxylariciresinol

 5,7,3'-Trihydroxy-4'-methoxy-8-p

大麥類芽胞桿 4'-O-trans-p-Coumaroylmussaenosi

球孢白僵 4-O-Methylhelichrysetin

大蓋小皮傘 4-羥基三尖杉堿

水生黃桿 4-Hydroxy-3-(3-methyl-2-butenoyl

黏瓊脂芽孢桿 4',9,9'-Trihydroxy-3'-methoxy- 3

環(huán)狀芽胞桿 4,5-Epoxyartemisinic acid

水生拉恩氏 4,5-Dihydroblumenol A

釀酒酵母 3-O-(E)-p-Coumaroylbetulin

詹氏桿 3-Isomangostin hydrate formate

溜曲霉 3-Hydroxy-5,7-dimethoxy-3',4'- m

根霉 3-Geranyl-4-methoxybenzoic acid

茸毛褐褶 3-去氧蘇木酮 B

 


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