當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T豬瘟病毒野毒株(CSFV-W)核酸檢測試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
豬瘟病毒野毒株(CSFV-W)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10319 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
米曲霉培養(yǎng)基: CM0085釀造醬油。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 定期移植法;其他
粉紅粘帚霉生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-299℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
HBUM171283模式菌株: no安全等級: 1種屬: Streptomyces│sp.土壤提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃
病實(shí)驗(yàn)研究其生物學(xué)活性,并進(jìn)一步從基因水平上進(jìn)行分析。模式菌株: no病雞呼吸道和大部分的消化道提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
無乳鏈球菌培養(yǎng)基: 56致病菌芯片提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no生長條件: 37℃ -80℃冰箱凍結(jié)法
ATCC9341抗生物質(zhì)殘留檢查。模式菌株: no種屬: Kocuria│rhizophila提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 30℃
純白鏈霉菌培養(yǎng)基: 0027代謝產(chǎn)物具有弱的抗菌活性。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
Biggis血清學(xué)分型 Pyrogenes biggis模式菌株: no種屬: Leptospira│interrogans提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: CM0114生長條件: 37℃
-300℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
根霉生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌培養(yǎng)基: 141模式菌株: no根內(nèi)提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 28 定期移植法
泡盛曲霉生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0015提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
桔灰青霉生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 0013提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
副豬嗜血桿菌科研教學(xué)模式菌株: no心血提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
金黃色葡萄球菌用于科研模式菌株: no病料提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
麥康凱瓊脂2號250g腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)(OXOID方法)
Malt extract agar麥芽瓊脂 1.05398.0500 MERCK默克 incubation media Malt extract agar麥芽瓊脂 1.05398.0500 MERCK默克
胰月示-亞鹽-環(huán)絲氨瓊脂基礎(chǔ)(TSC) 100g 食品和臨床樣本中產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)(SN0177-92,ISO標(biāo)準(zhǔn))。
大鼠肝*培養(yǎng)基Mediumofratlivercells
Eosin-MethyleneBlueAgar
念珠菌顯色培養(yǎng)基 1000ml/瓶 念珠菌特別是白色念珠菌的選擇性分離和初步鑒別
志賀氏菌顯色培養(yǎng)基 1000ml/瓶 志賀氏菌顯色培養(yǎng)基
霍亂弧菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 水產(chǎn)品及食物中樣品中霍亂弧菌的分離和鑒定
弧菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 水產(chǎn)品及食物中樣品中弧菌特別是副溶血性弧菌的分離和鑒定
豬瘟病毒野毒株(CSFV-W)核酸檢測試劑盒YM11瓊脂規(guī)格:250g用途:濾膜法用于霉菌、酵母菌的分離培養(yǎng)
賴氨脫羧酶實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基規(guī)格:BR5g詳情介紹
TSA表面接觸皿(6.5cm)規(guī)格:10個/包用途:用于環(huán)境、器皿、設(shè)備和表面的無菌檢測
月桂基硫鹽胰蛋白胨肉湯(LST)顆粒規(guī)格:300ml/袋*10用途:用于大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
波爾頓選擇性增菌肉湯添加劑規(guī)格:2ml/支*5用途:每支添加于225ml中HB0273中
柯氏尿素瓊脂規(guī)格:250g用途:用于細(xì)菌脲酶檢測
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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