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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>抑制劑激活劑>> CSF-1R抑制劑(BLZ945)
貨號(hào) | FS-X10399 |
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產(chǎn)品介紹:
英文名稱:BLZ945 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg BLZ945是一種可滲透腦的CSF-1R抑制劑,IC50為1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):953769-46-5 純度:98.57% 分子量:398.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱:CSF-1R抑制劑(BLZ945)
英文名稱:BLZ945
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號(hào):FS-X10399
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)朊假絲酵母配對(duì)盒基因7抗體Anti-ADRA2A Antibody蛋白精甲基轉(zhuǎn)移1(PRMT1)
靈芝(赤芝,紅靈芝)激活激PAK7抗體Anti-ADRA2A Antibody蛋白激C(PKC)
德斯霉孕激誘導(dǎo)阻斷因子抗體Anti-ADRB2 Antibody蛋白激C beta II(PKC-bII)
栗疫菌增殖核抗原抗體Anti-ADRB2 Antibody蛋白激B(PKB)
節(jié)桿菌增殖核抗原抗體Anti-ADRB3 Antibody蛋白激A(PKA)
釀酒酵母piwi樣1蛋白抗體Anti-ADRB3 Antibody蛋白基因產(chǎn)物9.5(PGP 9.5)
籃狀菌屬血小板源性生長(zhǎng)因子A抗體Anti-AFG3L2 Antibody蛋白二硫化物異構(gòu)前體(PDI)
李氏擬諾卡氏菌泌乳抗體Anti-AEBP2 Antibody蛋白二硫化物異構(gòu)A3(PDIA3)
淡紫擬青霉菌血小板源性生長(zhǎng)因子-B抗體Anti-ADRBK2 Antibody蛋白Z(Protein Z)
大腸桿菌血小板源性生長(zhǎng)因子受體A抗體(PDGFRα)Anti-AFF4 Antibody蛋白S(ProteinS)
雅致放射毛霉血小板源性生長(zhǎng)因子受體B抗體(PDGFRβ)Anti-AFM Antibody蛋白S(Protein S)
香菇脫氫激4抗體Anti-AFP Antibody蛋白C(ProteinC)
平凡假單胞菌色上皮源性因子抗體Anti-AFP Antibody蛋白C(Protein C)
莖點(diǎn)霉屬肝癌高表達(dá)基因抗體Anti-AGER Antibody蛋白C(PC)
簇生離褶傘腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體Anti-Afm Antibody蛋白ATP1B4(ATP1B4)
光陽微泡菌腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體Anti-Aggrecan(ACAN) Antibody蛋白(肽酰脯酰順/反異構(gòu))NIMA結(jié)合1(PIN1)
宇佐美曲霉Aspergillus│usamii 質(zhì)量規(guī)格:>97%
粉狀畢赤酵母Pichia│farinosa 質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的PI3K δ/γ抑制劑
ATCC6939資源名稱: 馬紅球菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,美國(guó)進(jìn)口
CSF-1R抑制劑(BLZ945)北方棲低境 4-氨基-2-甲氧基便隱血
維羅納假單胞 3-溴-2-吡啶Ras同源基因家族成員A
枯草芽孢桿 1,3-二甲氧基-5-氟苯硝鹽
韓國(guó)游動(dòng)微 三氟磺釤支原體
茶藨子葡萄座腔 三氟甲磺鐠泰澤病原體
美味絲葚霉 三氟甲磺銪弓形蟲IgM抗體
馬腺疫鏈球獸疫亞種 4-(2-溴乙基)漢坦病
糞銹傘 4-環(huán)氧烷氧基咔唑呼腸弧病3
不動(dòng)桿屬 5-溴-2-(甲硫基)吡啶仙臺(tái)病
Aurantimonas altamirensis 4-氨基肺炎病
紅色長(zhǎng)孢鏈霉 7-氨基細(xì)小病RV株
大雞03 5-氨基細(xì)小病H-1株
粗糙脈孢 4-喹唑啉
科氏葡萄球科氏亞種 (±)-α-煙β內(nèi)酰
蠟狀芽孢桿 3,4-二甲氧基噻吩生長(zhǎng)釋放受體
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