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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測(cè)試劑盒>>熒光PCR法>> 50T豬流感(SIV)核酸檢測(cè)試劑盒
對(duì)蝦黃頭病病毒(YHV)核酸定性檢測(cè)試劑盒
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
豬流感(SIV)核酸檢測(cè)試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10315 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測(cè)試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
1ATCC7050CCM2013NCIB9365NCTC10334模式菌株: yes安全等級(jí): 1種屬: Bacillus│coagulans乳制品提供形式: 凍干物產(chǎn)糖苷水解酶抑制物、產(chǎn)L(+)乳培養(yǎng)基: 348
Streptococcus dentirousetti
絲蓋口蘑培養(yǎng)基: 14模式菌株: no菌蓋或菌柄提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 26 定期移植法
青霉菌屬菌種抗真菌模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 26C
小葉三點(diǎn)金根瘤菌固氮模式菌株: no根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 63生長(zhǎng)條件: 28-30
CBS462.72=IBT14679模式菌株: yes安全等級(jí): 1種屬: Eupenicillium│osmophilum土壤提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: CM0072生長(zhǎng)條件: 25℃
-295℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
發(fā)酵乳桿菌培養(yǎng)基: CM0006模式菌株: no健康孕婦分泌物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 37℃ -80℃冰箱凍結(jié)法
穿孔艾美耳球蟲用于科研模式菌株: no兔糞便提供形式: 其他安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 0生長(zhǎng)條件: 37
鏈霉菌生長(zhǎng)條件: 28℃培養(yǎng)基: 0012提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
角磷白鵝膏生長(zhǎng)條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
褐紅小孔菌生長(zhǎng)條件: 25培養(yǎng)基: 14紅錐提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no 定期移植法
29O1/classical 稻葉(Inaba)模式菌株: no種屬: Vibrio│cholerae O1提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3培養(yǎng)基: CM0116生長(zhǎng)條件: 37℃
-296℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
伊拉克固氮螺菌生長(zhǎng)條件: 37℃培養(yǎng)基: 0448提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
曲霉屬培養(yǎng)基: CM0014抗癌活性提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28C 真空冷凍干燥
0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基28032250g鏈霉素等抗生素的無菌檢查及消技術(shù)規(guī)范。(《中華人民共和國(guó)藥典》20
Malt Extract 麥芽浸膏 500g incubation media Malt Extract 麥芽浸膏 500g
香茅醇假單胞菌 支/瓶
DCLSAgar
Lysozyme
MS培養(yǎng)基 MS Medium 250克 植物組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
MS培養(yǎng)基(含維生素) MS Medium with vitamins 10升 BR
Nitsch培養(yǎng)基(含維生素) Nitsch Medium with vitamins 10升 BR
Nitsch培養(yǎng)基 Nitsch Medium 10升 BR
豬流感(SIV)核酸檢測(cè)試劑盒PH7.0化鈉-蛋白胨緩沖液規(guī)格:BR250g詳情介紹
包姜氏瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于百日咳菌分離培養(yǎng)
TTC(氮藍(lán)四唑)規(guī)格:10g用途:添加于TTC瓊脂基礎(chǔ)中
Amies運(yùn)送培養(yǎng)基管規(guī)格:20支/包用途:用于致病菌標(biāo)本的運(yùn)送保存
脫氧核糖核(DNA)(粉末狀)規(guī)格:1g詳情介紹
4-甲基傘形葡糖苷(MUG)對(duì)照培養(yǎng)基規(guī)格:2.3g/100ml用途:培養(yǎng)基適用性實(shí)驗(yàn)
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