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Wnt抑制劑(IWR-1)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-18 15:01:56瀏覽次數(shù):165次

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貨號 FS-X10490
Wnt抑制劑(IWR-1)正在熱銷的產(chǎn)品:HCV-NS1 型肝炎病-NS1(抗原)氫氟 ACS
HCV-NS3 型肝炎病-NS3(抗原)氫氟 電子級,49wt. % in H2O,≥99.99998%metals basis
HCV-NS4a 型肝炎病-NS4a(抗原)異 standard for GC,≥99.9% (GC)
HEV 戊型肝炎病(抗原)異 for HPLC, 99.8%

產(chǎn)品介紹:

英文名稱:IWR-1

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

IWR-1是一種Wnt抑制劑,在L Wnt-3A細(xì)胞中,IC50值為180nM,通過穩(wěn)定Axin破壞復(fù)合體來提高β-連環(huán)素的磷酸化。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:1127442-82-3

別名:endo-IWR 1;IWR-1-endo

純度:99.83%

分子量:409.44

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

中文名稱:Wnt抑制劑(IWR-1)

英文名稱:IWR-1

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

貨號:FS-X10490

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

根瘤菌離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白SLC7A9抗體Anti-FN1 Antibody性別決定區(qū)Y框蛋白18(SOX18)

谷棒桿菌溶質(zhì)載體蛋白家族20成員2抗體Anti-FOSB Antibody性別決定區(qū)Y框蛋白1(SOX1)

硬水黃桿菌S100鈣結(jié)合蛋白A6抗體Anti-FNDC5 Antibody興奮性基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(EAAT5)

鐮刀菌屬堿性螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子SCXA抗體Anti-FOS Antibody興奮性基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(EAAT4)

清道夫受體STAB2抗體Anti-FOSB Antibody興奮性基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(EAAT3)

嗜一氧化碳假諾卡氏菌維甲誘導(dǎo)蛋白6抗體Anti-FOSB Antibody興奮性基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(EAAT2)

香菇骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST抗體Anti-FOSL2 Antibody興奮性基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(EAAT1)

魯氏淀粉霉α橫紋肌輔肌動蛋白/α-SCA抗體Anti-FOSL1 Antibody形成結(jié)合蛋白1(FNBP1)

費(fèi)比恩畢赤酵母新型分泌表面蛋白/成骨相關(guān)蛋白SCUBE3抗體Anti-FOXA1 Antibody形成2(FMN2)

1ml吸頭內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE2抗體Anti-FOXA3 Antibody形成1(FMN1)

光神農(nóng)球菌亞硫鹽氧化抗體Anti-FOXC1 Antibody星形肌動蛋白2(ASTN2)

芽枝狀枝孢生長抑抗體Anti-FOXF1 Antibody星形肌動蛋白1(ASTN1)

 (蠟狀芽胞桿菌)磷化突觸融合蛋白1抗體Anti-FOXE1 Antibody信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接分子1(STAM1)

佛羅里達(dá)無孢子側(cè)耳固酰脫氫1抗體Anti-FOXI1 Antibody信號7A(SEMA7A)

枯草芽孢桿菌解旋SNF2L抗體Anti-FOXK1 Antibody信號6D(SEMA6D)

大腸埃希氏菌山梨脫氫抗體Anti-FOXL1 Antibody信號6C(SEMA6C)

Smad蛋白相互作用蛋白1抗體棒狀乳桿菌棒狀亞種H22小鼠肝癌細(xì)胞

Schlafen家族14抗體唾液乳桿菌水楊亞種NCTC 1469小鼠正常肝細(xì)胞

SEMCAP3蛋白抗體綠色乳桿菌U14小鼠子宮頸癌細(xì)胞

小泛相關(guān)修飾蛋白1抗體詹氏桿菌IEC-6大鼠小腸上皮細(xì)胞系
Wnt抑制劑(IWR-1)黑曲霉 噻吩并[3,2-b]噻吩色羥化1

金黃殼囊孢 (R)-(-)-3-甲乙酯原癌基因c-Met蛋白

日本曲霉 (R)-(-)-3-甲早期生長反應(yīng)因子4

肺炎克雷伯氏 2-雙環(huán)己基膦-2 '-甲基聯(lián)苯ED-1;sCD68分子

枝孢霉 2,5-二溴噻吩[3,2-b]噻吩次-鳥磷核糖轉(zhuǎn)移

栗色牛肝 1-溴-4-環(huán)己基苯鳥脫氨

豬丹絲 3,5-二甲基異惡唑-4-羧羧化基質(zhì)谷蛋白

香蕉 3-乙炔基吡啶HMG-CoA還原

褐球固氮 N-Boc-N'-succinyl-4,7,10-trioxa-1,13-tridecanediam過氧化物還原1

法氏沃氏黃桿 聚己內(nèi)酰粉Janus激1

土曲霉 聚己內(nèi)酰粉Janus激3

毛木耳 聚己內(nèi)酰粉次-鳥磷核糖轉(zhuǎn)移

多變毛霉 聚己內(nèi)酰粉磷脂酰肌糖生物合成類F蛋白

產(chǎn)氣莢膜梭       C型 1,3-二(2,6-二異基苯基)化咪唑過氧化物還原6

蠟狀芽孢桿 N-(叔丁氧羰基)-1-(2,4-二基)-L-組過氧化物還原6

 


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