Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制劑)-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X10218

中文名稱：Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制劑)

英文名稱：Caspase 4 Inhibitors Z-VAD-FMK

產(chǎn)品規(guī)格：20μl

貨號：FS-X10218

產(chǎn)品介紹:

英文名稱：Caspase 4 Inhibitors Z-VAD-FMK

產(chǎn)品規(guī)格：20μl

濃度：5mM in DMSO

分子式：C21H28FN3O7

分子量：453.5

含量：77～97%(TLC)

純度：≥92%(HPLC)

儲存：-20℃，有效期6個月

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

蕈狀芽孢桿菌胰高血糖樣肽-1抗體Human Syntaxin 6 大鼠基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌顆粒蛋白前體抗體Human TADA2B 大鼠基質(zhì)金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒

硬結(jié)節(jié)桿菌磷脂?；鞍拙厶?/span>1抗體Human STX1A(Syntaxin-1A) 大鼠基質(zhì)金屬蛋白4(MMP-4)免疫試劑盒

鞘菌糖原合激3α抗體Human TADA2L 大鼠基質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)免疫試劑盒

*灰葡萄孢慶大霉單克抗體Human TADA3L 大鼠基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒

糞腸球菌硫轉(zhuǎn)移ω1抗體Human TAF1L 大鼠基質(zhì)金屬蛋白14(MMP-14)免疫試劑盒

毛霉屬間隙連接蛋白31抗體Human TAF1 大鼠基質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒

弓形蟲(GJS-3株)甘-N-甲基轉(zhuǎn)移Human TAF3 大鼠基質(zhì)金屬蛋白10(MMP-10)免疫試劑盒

北京擲孢酵母G蛋白偶聯(lián)受體75抗體Human TAF7 大鼠基質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1/Collagenase I)免疫試劑盒

蓋替隱球酵母GATA結(jié)合蛋白4抗體Human TAF6L 大鼠肌質(zhì)網(wǎng)膜鈣ATP(SERCA)免疫試劑盒

淺灰小雙孢菌兔抗γ1基丁抗體Human TAF5L 大鼠肌激同工MM(CK-MM)免疫試劑盒

廣西腐霉G蛋白偶聯(lián)受體GPR85蛋白抗體Human DNASE1(Deoxyribonuclease-1) 大鼠肌激同工MB(CK-MB)免疫試劑盒

黑曲霉慶大霉抗體Human TAF9(Transcription initiation factor TFIID subunit 9) 大鼠肌激同工BB(CK-BB)免疫試劑盒

空腸彎曲桿菌半乳糖凝集9抗體Human TAF9B 大鼠肌球蛋白(MYS)免疫試劑盒

緣毛殼促代謝型谷受體2+4抗體Human Syntaxin 10 大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)免疫試劑盒

鞘桿菌GPNMB抗體Human STX1A(Syntaxin-1A) 大鼠肌酐(Cr)免疫試劑盒

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%黃杞

天麻萌發(fā)菌Mycena│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)晶蘭

豬呼吸與繁殖障礙綜合征病毒Arterivirus│Porcine respiratory and reproductive syndrome virus 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品8-O-乙酰山梔酯
Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制劑)橙色單胞 1，1-環(huán)烷二甲果糖

糞產(chǎn)堿桿* 2-環(huán)己基-2-羥基硫化氫

旱生紅曲霉 4-乙氧羰基苯抗肽LL-37

空腸彎曲桿 2,2,2-三氟乙基對甲苯磺酯血管緊張II

熒光假單胞桿 6-(5--2-吡啶基)-5H-吡咯并[3,4-b]吡-5,7(6H)-二酮過氧化物

大腸埃希支原體

金針菇—金白1號 4,6-二-5-硝基嘧啶泰澤病原體

Actinomadura amylolytica 1,1-二溴-3,3,3-三氟酮弓形蟲

糙皮側(cè)耳 2-酰噻唑呼腸弧病3

小麥蒼白桿叔丁氧羰基氨氧基乙肝炎病

栗疫 1-丁基-2-甲基肺炎病

腐生葡萄球 4--6-甲氧基喹啉鼠痘病

豇豆慢生根瘤 2-溴-4甲基芐細(xì)小病

大腸埃希氏 1-庚烷蛋白質(zhì)羰基

耶爾森氏 3,4-噻吩二羧8-異構(gòu)前列腺

国产精品成人网站,日韩视频二区,亚洲成人手机电影,怡红院国产

Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制劑) 返回列表頁

儀表網(wǎng)

會員登錄

收藏該商鋪

提示