DAPK抑制劑(TC-DAPK 6)-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X10819

中文名稱：DAPK抑制劑(TC-DAPK 6)

英文名稱：TC-DAPK 6

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

貨號：FS-X10819

產(chǎn)品介紹:

TC-DAPK6是一種有效的ATP競爭性的選擇性DAPK抑制劑，作用于DAPK1和DAPK3，IC50分別為69和225nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號：315694-89-4

別名：DAPK inhibitor

純度：95.0%

分子量：276.29

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

枯草芽孢桿菌大鼠網(wǎng)膜Anti-OR2F2 Antibody人肽酰脯酰異構(gòu)(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)

意外鏈霉菌人單核趨化蛋白1Anti-OR2G2 Antibody人肽酰脯酰異構(gòu)(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)

羅伊氏乳桿菌小鼠轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)Anti-OR2D2 Antibody人肽酰脯酰異構(gòu)(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)

釀酒酵母人L選擇Anti-OR2G3 Antibody人肽酰脯酰異構(gòu)(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)

毛霉屬小鼠骨形成蛋白Anti-OR2H2 Antibody人促分裂原活化蛋白激激活的蛋白激3(MAPKAPK3)

大腸埃希菌大鼠孤腓肽Anti-OR2I1P Antibody人促分裂原活化蛋白激激活的蛋白激3(MAPKAPK3)

球孢白僵菌小鼠視黃結(jié)合蛋白4Anti-OR2J3 Antibody人血管緊張Ⅰ轉(zhuǎn)化(ACEⅠ)

樟疫霉人白介9Anti-OR2J2 Antibody人血管緊張Ⅰ轉(zhuǎn)化(ACEⅠ)

E.coli EPI400大鼠蛋白磷Anti-OR2K2 Antibody人抑肽(AP)

產(chǎn)腸大腸埃希氏菌大鼠硫氧還蛋白還原Anti-OR2L5 Antibody人抑肽(AP)

白淺灰鏈霉菌人白介8Anti-OR2M3 Antibody人胱天蛋白12(Casp-12)

中國漢納酵母小鼠6前列腺F1aAnti-OR2M7 Antibody人胱天蛋白12(Casp-12)

樟疫霉人白介6Anti-OR2M2 Antibody人胱天蛋白12(Casp-12)

黃桿菌大鼠硫氧化還原蛋白Anti-OR2T1 Antibody人胱天蛋白12(Casp-12)

枯草芽孢桿菌小鼠戊糖Anti-OR2T10 Antibody人蛋白激A(PKA)

廣布擬盤多毛孢大鼠膠原IIAnti-OR2T2 Antibody人蛋白激A(PKA)

環(huán)指蛋白32抗體#雙輪絲鏈霉菌小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細胞

RNA結(jié)合蛋白26抗體#草菇乳乳球菌組成型表達質(zhì)粒

Nogo66受體相關蛋白3抗體#天藍色鏈霉菌McCoy s 5A基礎培養(yǎng)基：

RNA尿合結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體花生生莖點霉兔紅細胞6%
DAPK抑制劑(TC-DAPK 6)矩圓黑盤孢豌豆浸粉超氧化物歧化

雅致放射毛霉頭孢紙片（30ug/片）

塔賓曲霉萘啶酮紙片（30ug/片）乙酰酯

Sphingobacteriaceae CC瓊脂添加劑酪

解酯假絲酵母解酯變種纖維二糖-多粘E（CC）瓊脂胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3

布魯氏生物Ⅱ型大腸桿/大腸群液體顯色培養(yǎng)基球蛋白A

枯草芽胞桿枯草亞種 MMO-MUG培養(yǎng)基粘蛋白5AC

糙孢曲霉 MUGal肉湯晝夜自發(fā)輸出周期蛋白kaput

畢赤酵母霉、酵母快檢紙片食欲肽

膠孢山梨麥康凱瓊脂基礎（SMAC）CD4分子

鏈霉改良麥康凱肉湯（CT-MAC）粘蛋白;粘液5B

變異鏈球 Cary-Blair氏運送培養(yǎng)基可溶性球蛋白A

嗜中溫寒冷桿茜-β-半乳糖肉湯（Aliz-gal肉湯）白三烯C4

木拉克酵母屬半胱稀釋液半胱氨酰白三烯受體2

馬里努斯咸海鮮球溴甲紫蛋白胨培養(yǎng)液半胱白三烯受體1

国产精品成人网站,日韩视频二区,亚洲成人手机电影,怡红院国产

DAPK抑制劑(TC-DAPK 6) 返回列表頁

儀表網(wǎng)

會員登錄

收藏該商鋪

提示