實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

PCR技術(shù)的定量原理：
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于液中。
PCR檢測(cè)試劑盒：
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
糙皮側(cè)耳(平菇)培養(yǎng)基: 0014食用、藥用提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長條件: 25℃ -80℃冰箱凍結(jié)法

柴油食烷菌有機(jī)污染物降解菌/石油烴類降解菌模式菌株: no水樣/近海海水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 28℃

河生腸桿菌培養(yǎng)基: 832模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法

 -386℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

芽胞桿菌無機(jī)污染物抗性菌/抗二價(jià)鉛Pb 產(chǎn)酶微生物/ 蛋白酶、淀粉酶、脂酶（三丁甘油酯）模式菌株: no沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 472生長條件: 28℃

百日咳博德特氏菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0119提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法

郎伍德鏈霉菌培養(yǎng)基: 12可用于抗菌活性及抗腫瘤活性研究土壤/近海紅樹林土壤提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

猴頭菇食用菌模式菌株: no組織塊提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: PDA 培養(yǎng)基：馬鈴薯提取液 1.0 L，葡萄糖 20.0 g，瓊脂 15.0 g，自然pH生長條件: 25-30℃，好氧

AS2.126酒精。模式菌株: no種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃

鏈霉菌屬菌種抗耐藥細(xì)菌模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C

 -387℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

葡萄座腔菌 定期移植法生長條件: 25-28提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 14

大西洋假絲酵母共生微生物/魚類共生菌模式菌株: no生物樣/鰶 頭皮提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 513生長條件: 28℃

頂孢頭孢霉生長條件: 25培養(yǎng)基: 14蘋果果實(shí)提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no 定期移植法

紡錘單頂孢培養(yǎng)基: 18模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長條件: 25-28℃

釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0013用于啤酒提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 真空冷凍干燥法

對(duì)本二酚xy7noinoneoneAR250g

G8140Goldview I型核染色劑1ml151

G7250-1GD-Glucose-6-phosphate Na2 D-葡萄糖-6-磷二鈉 (羅比森酯)3671-99-61g

EDTA抗原修復(fù)液(50X)100ml

metxyl Green, Zinc Chloride Salt25g

甲基環(huán)己烷metxyl cyclohexaneGCS2ml

LBI01兔抗鼠IgG314

CB2531-10GBenzamidine xy7nochloride 鹽本甲脒(芐脒)1670-14-010g

Con A100mg

Yeast Extract100*500g

大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷磷(NAADP)ELISA試劑盒 ，英文名： NAADP ELISA Kit

Mouse thrombin receptor () ELISA Kit 小鼠凝血酶受體()ELISA試劑盒

MouseErythropoietieceptor,EPORELISAKit 小鼠紅生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanCompleme4,C4ELISAKit人補(bǔ)體蛋白4規(guī)格：48T/96T

EINKINASE1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitLebtospira大鼠鉤端螺旋體IgG規(guī)格：48T/96T
馬鏈球菌（S. equi）核酸檢測(cè)試劑盒D-核糖規(guī)格：25g用途：微生物指示劑

假單胞cfc選擇性培養(yǎng)基添加劑規(guī)格：1ml/支*5用途：每支添加于200ml HB8689中

改良愛德華瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格：250g用途：用于牛炎鏈球菌的選擇性分離培養(yǎng)

TNM-FH昆蟲培養(yǎng)基規(guī)格：500mL詳情介紹

緩沖蛋白胨水(BPW)規(guī)格：300ml/袋*10用途：用于阪崎桿菌前增菌培養(yǎng) （GB標(biāo)準(zhǔn)）

淀粉-雙岐桿菌鑒定規(guī)格：20支詳情介紹