PCR的反應(yīng)條件：
因擴增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小，設(shè)定25～30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少，擴增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時，每kbp大體可設(shè)定30秒～1分鐘；當溫度設(shè)定在68℃以下時, 時間設(shè)定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產(chǎn)物；Anneal溫度太低時，容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成；而Extension時間太長時，會出現(xiàn)Smear。
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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：犬細小病毒（CPV）核酸定性檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品貨號：FS-P10655
產(chǎn)品分類：PCR法
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟 
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開，分別測定熒光強度，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標和引物，內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標與靶模板的長度不同，二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物，擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合，再加入抗di高辛或生物素酶標抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內(nèi)標，作出標準曲線，也可實現(xiàn)定量檢測目的。
實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此，實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時，剛剛進入真正的指數(shù)擴增期（對數(shù)期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現(xiàn)性，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確，重現(xiàn)性*定量方法，已得到的*，廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
赤紅球菌培養(yǎng)基: 471可用于抗菌活性及抗腫瘤活性研究土壤/近海紅樹林土壤提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

卵形節(jié)叢孢培養(yǎng)基: 18模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法；礦物油法

 -987℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

弧菌共附生微生物/黃翅魚腸體內(nèi)容物共生菌模式菌株: no生物樣/黃翅魚腸體內(nèi)容物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 33生長條件: 25℃

沃氏葡萄球菌1.海洋石油污染生物修復; 4.生物活性物質(zhì)篩選模式菌株: no沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃

 C2(1953)噬菌體分型用 Vi C2　　　9,12,Vi　d　-模式菌株: no種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃

ATCC700610模式菌株: no安全等級: 1種屬: Streptococcus│mutans齲齒兒童提供形式: 凍干物研究，質(zhì)量控制。培養(yǎng)基: CM0217

核盤菌培養(yǎng)基: 14油菜菌核病病菌的多樣性分析提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 20℃ 真空冷凍干燥法；定期移植法

綠色糖單孢菌福建變種培養(yǎng)基: CM0038篩選菌株提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37C 真空冷凍干燥

 -988℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

ATCC6633=CCRC10447=DSM347=IFO3134抗生素測定菌;模式菌株: no種屬: Bacillus│subtilis subsp. subtilis提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃

普通變形菌培養(yǎng)基: 0002模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 35℃ -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法

大洋桿狀菌培養(yǎng)基: 4711.生物降解；2.生物催化；3.生物活性物質(zhì)篩選； 4.海洋微生物生態(tài)學研究。水樣/表層海水提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

根瘤菌(紫云英)培養(yǎng)基: 0053與沙打旺、斜莖黃芪共生固氮提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法；礦物油法

大腸埃希氏菌基因工程常用菌模式菌株: no污泥提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 33生長條件: 37℃

聚生殼菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no枝干提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；定期移植法

3,4,5-氧基芐胺

4-三磺酰胺

N-BOC-脒三基膦

1,4-二溴-2,5-二甲氧基

Diphenyl diselenide  二基二硒  1666-13-3

Selenium dioxide    2025852

TETRAPHENYLARSONIUM CHLORIDE  化四砷  507-28-8

NEOTHORIN  偶氮砷Ⅰ  3547-38-4

大鼠腫瘤壞死因子(配體)超家族成員14(TNFSF14)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFSF14 ELISA Kit

人抗SS-A/Ro抗體ELISA檢測試劑盒HumanSS-A/RoaibodyELISAKit 96T/48T

大鼠補體片斷3(C3)免疫試劑盒 Rat Compleme fragme 3,C3 ELISA Kit

CLIAKitfoM(Humahrombin)ELISAKit人凝血酶規(guī)格：48T/96T

全組織免疫熒光顯微鏡間接檢測試劑盒(含熒光二抗)20次

ELISAKitai-chromosomeAb人抗染色體抗體規(guī)格：48T/96T
犬細小病毒（CPV）核酸定性檢測試劑盒通關(guān)藤苷I191729-44-9中文別名：通關(guān)藤甙I  

英文名：Tenacissoside I  

英文別名：Tenacissimoside B；;(3beta,5alpha,11alpha,12beta,14beta,17alpha)-12-(Acetyloxy)-11-(benzoyloxy)-3-[[2,6-dideoxy-4-O-(6-deoxy-3-O-methyl-beta-D-allopyranosyl)-3-O-methyl-beta-D-arabino-hexopyranosyl]oxy]-8,14-epoxypregnan-20-one  

登錄號：191729-44-9

分子式：C44H62O14

分子量：814.95

分子結(jié)構(gòu)：

外觀：無色針狀晶體

規(guī)格：20 mg/支

純度：≥ 98%

用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源：蘿藦科牛奶菜屬植物通關(guān)藤 Marsdenia tenacissima (Roxb.) Wight et Arn.

溶解性：可溶于、DMSO，不溶于、二等溶劑。

熔點：152～156 ℃

旋光度：+30° ()

藥理藥效：平喘、免疫調(diào)節(jié)、戒及良好的抗癌活性

貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年