一区精品视频,天堂在线天堂

貨號(hào)	FS-X10991

中文名稱：PFKFB3抑制劑(PFK-158)

英文名稱：PFK-158

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號(hào)：FS-X10991

產(chǎn)品介紹:

PFK-158是一種有效的選擇性PFKFB3抑制劑，目前對(duì)晚期實(shí)體瘤研究處于臨床一期階段。

注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號(hào)：1462249-75-7

純度：98.11%

分子量：328.29

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

葡枝根霉Escherichia coli大鼠視黃結(jié)合蛋白(RBP)

棒狀雙歧桿菌Escherichia coli大鼠促性腺激釋放激受體抗體(GNRHR-Ab)

枝狀枝孢菌Escherichia coli大鼠促性腺激釋放激受體抗體(GNRHR-Ab)

芽孢桿菌Escherichia coli大鼠血管性血友病因子裂解蛋白(ADAMTS13/vWF-cp)

枯草芽孢桿菌Escherichia coli大鼠血管性血友病因子裂解蛋白(ADAMTS13/vWF-cp)

變異棒桿菌Escherichia coli大鼠主要堿性蛋白(MBP)

木霉屬Escherichia coli大鼠主要堿性蛋白(MBP)

萬壽菊黃色桿菌Escherichia coli大鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)

局限青霉Escherichia coli大鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)

盤長(zhǎng)孢狀盤孢Escherichia coli大鼠鈣調(diào)磷(CaN)

蘑菇Escherichia coli大鼠鈣調(diào)磷(CaN)

皺褶青霉Escherichia coli大鼠抑制結(jié)合蛋白(INHBP)

褐平臍蠕孢Escherichia coli大鼠抑制結(jié)合蛋白(INHBP)

嗜幾丁質(zhì)芽孢桿菌Escherichia coli大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)

魯?shù)劓溍咕?/span>Escherichia coli大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)

黃綠木霉Escherichia coli大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)

蛋白體復(fù)合物C5抗體小孔異擔(dān)子菌花鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞

磷脂A2激活蛋白抗體光核纖孔菌花鼠腎上皮樣細(xì)胞

胸磷化抗體齒白木層孔菌銀星竹鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞

早老蛋白-2抗體擬緣小孔菌姬鼠皮膚細(xì)胞
PFKFB3抑制劑(PFK-158)斡氏假單胞 β-D-乳糖

枯草芽孢桿愈創(chuàng)木

蘇云金芽孢桿喇叭茶

布氏檸檬桿雌二

釀酒酵母馬尾柴

藤倉(cāng)鐮孢香草甲酯糖

粉狀畢赤酵母 4-(N-馬來酰亞甲基)環(huán)己烷-1-羧磺基琥珀酰亞酯鈉鹽

釀酒酵母仙茅木

芒果囊孢屬 5,6,3',4'-四羥基-7-甲氧基黃酮

鮭色野野村氏新橙皮二氫查爾酮

假單胞脫氫山楂

猴假單胞 -羥基-6-鐵屎酮

粟褐芽孢桿硝鋱

黑曲霉曼陀羅萜酮

矩圓黑盤孢活性紅 K-7B

国产精品成人网站,精品人妻互换一区二区三区,大肉大捧一进一出视频免费的试看,婷婷激情综合网

PFKFB3抑制劑(PFK-158) 返回列表頁

儀表網(wǎng)

會(huì)員登錄

收藏該商鋪

提示