實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

PCR技術(shù)的定量原理：
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于液中。
PCR檢測(cè)試劑盒：
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
大腸埃希氏菌生長(zhǎng)條件: 37℃培養(yǎng)基: 33提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法

糙皮側(cè)耳(平菇)生長(zhǎng)條件: 25℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no

菊池鏈格孢培養(yǎng)基: 14模式菌株: no梨葉提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 26--30 定期移植法

蜜環(huán)菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no天麻提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 25-32 定期移植法

大腸埃希氏菌動(dòng)物疫苗模式菌株: no鴨胚大腸提供形式: 斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃

BCRC17944=JCM21735=IAM15284=CCTCCAB205006培養(yǎng)基: CM0002模式菌株: yes種屬: Terrimonas│lutea提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

 -359℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

 AS3.2835培養(yǎng)基: 14,17九二0產(chǎn)生菌種屬: FusariummoniliformeSheldon安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25-28℃

杉木假單胞菌培養(yǎng)基: 0002杉樹(shù)細(xì)菌性葉枯病菌提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 30℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌分類學(xué)及海洋微生物研模式菌株: no沉積物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 0223生長(zhǎng)條件: 30℃

芽孢桿菌屬產(chǎn)果膠酶模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 37℃

谷氨棒桿菌生長(zhǎng)條件: 30℃培養(yǎng)基: 2提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法

短桿菌培養(yǎng)基: 33模式菌株: no土樣提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 50℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他

 -360℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

仁果叢梗孢培養(yǎng)基: 14模式菌株: no蘋果果實(shí)提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 25 定期移植法

鏈格孢培養(yǎng)基: 14模式菌株: no芍藥葉部提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 25 定期移植法

冰乙Acetic acid glacialGR500ml

ST-150-X1.5 ml 螺口尖底凍存管(琥珀色)(無(wú)蓋)97

G8751-1GGlycogen Type II 糖原II9005-79-21g

0.1M檸檬抗原修復(fù)液1L

Mega-8

本StyreneGCS2ml

SM0312GeneRuler 1kb DNA Ladder196

C7902-500GCalcium Chloride 錄化鈣10035-04-8500g

Cholesterol100g

瑞氏色素5g

大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒 ，英文名： PDGFsR-α ELISA Kit

人胸腺肽α1(Thymosinα1)ELISA檢測(cè)試劑盒Humahymosinα1ELISAKit 96T/48T

大鼠SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)免疫試劑盒 Rat SHC-ansforming protein 1,SHC1 ELISA kit

CLIAKitforsPLA2(RatsecretedphospholipaseA2,sPLA2)ELISAKit大鼠分泌型磷脂酶A2規(guī)格：48T/96T

肉類氟元素比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitMDC/CCL22人巨噬來(lái)源的趨化因子規(guī)格：48T/96T
牛支原體（MYPB）核酸檢測(cè)試劑盒Baird-Perkar瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基規(guī)格：BR250g詳情介紹

SD-39瓊脂規(guī)格：250g用途：用于濾膜法大腸桿菌O157的分離培養(yǎng) （Neogen方法）

PBS緩沖液（PH7.4）規(guī)格：250g用途：用于檢測(cè)李斯特氏菌時(shí)樣品的制備

1/4MS培養(yǎng)基（不含瓊脂和蔗糖）規(guī)格：250g用途：用于植物的組織培養(yǎng)。

水稻水培養(yǎng)液規(guī)格：250g用途：用于水稻的水培養(yǎng)液

馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）顆粒規(guī)格：300ml/袋*10用途：用于霉菌酵母菌計(jì)數(shù)