當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T沙門氏菌(SPP)核酸定性檢測試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
沙門氏菌(SPP)核酸定性檢測試劑盒 | PCR法 | FS-P10682 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
中國黃海菌近海細(xì)菌模式菌株: no生物樣/海灘腐海草提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃
-1060℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
CIP108668=DSM15871模式菌株: yes安全等級: 1種屬: Marinomonas│ushuaiensisCoastal seawater提供形式: 凍干物模式菌株培養(yǎng)基: 223
CICC1809=AS2.1390=IFO0678=JCM3767生長條件: 28-30培養(yǎng)基: 13或144種屬: Lipomycesstarkeyi安全等級: 1模式菌株: no
光滑新薩托菌生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no
CGMCC1.7299模式菌株: yes安全等級: 1種屬: Deinococcus│gobiensis黃沙土提供形式: 凍干物模式菌株培養(yǎng)基: 0007
蒼白桿菌培養(yǎng)基: 33模式菌株: no土樣提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 37℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
狗尾草長蠕孢培養(yǎng)基: 14模式菌株: no谷子葉片提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 26--30 定期移植法
-1061℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
小單孢菌 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法生長條件: 28℃提供形式: 凍干物模式菌株: yes培養(yǎng)基: 38
意外小白卵狀菌微生物/高溫菌(55℃)模式菌株: no水樣/上層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 55℃
阿布拉鏈霉菌分類模式菌株: no公園土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃
焦曲霉生長條件: 28-30℃培養(yǎng)基: CM0015提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
HBUM84023模式菌株: no安全等級: 1種屬: Streptomyces│hydroscopicus subsp. ossamyceticus土壤提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃
AS1.3、ATCC8014培養(yǎng)基: 2測尼克等種屬: Lactobacillusplantarum(Orla-Jensen)Holland安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃
-1062℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
沙門氏菌(SPP)核酸定性檢測試劑盒蒙花苷480-36-4中文別名:蒙花甙
英文名:Buddleoside
英文別名:7-[[6-O-(6-deoxy-alpha-L-mannopyranosyl)-beta-D-glucopyranosyl]oxy]-5-hydroxy-2-(4-methoxyphenyl)-4H-benzopyran-4-one
登錄號(hào):480-36-4
分子式:C28H32O14
分子量:592.54
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色粉末
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源:菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.
溶解性:可溶于熱、DMSO,不溶于。
藥理藥效:抗衰老作用、抗缺氧作用、抗不良刺激作用、對機(jī)體雙向調(diào)節(jié)作用、抗疲勞作用、抑制血糖升高作用 、性及致突變性致畸方面的研究、對學(xué)習(xí)記憶的影響。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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