您好, 歡迎來(lái)到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>抑制劑激活劑>> Mcl-1SMI抑制劑(UMI-77)
貨號(hào) | FS-X10994 |
---|
產(chǎn)品介紹:
UMI-77是一種新型Mcl-1SMI選擇性抑制劑,結(jié)合至Mcl-1BH3結(jié)構(gòu)溝,Ki值為490nM,對(duì)抗凋亡的Bcl-2家族其他成員具有選擇性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):518303-20-3 純度:98.04% 分子量:468.34 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱:Mcl-1SMI抑制劑(UMI-77)
英文名稱:UMI-77
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
貨號(hào):FS-X10994
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
柔嫩艾美耳球蟲(chóng)Escherichia coli大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)
薔薇枝枯病Escherichia coli大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)
根瘤菌Escherichia coli大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)
微小合軸酵母Escherichia coli大鼠胰島自身抗體(IAA)
皮奧利亞類芽孢桿菌Escherichia coli大鼠胰島自身抗體(IAA)
多主葡萄座腔菌Escherichia coli大鼠抗核膜糖蛋白2抗體(gp2)
非食用色堿性橙Ⅱ(王金黃)對(duì)照液Escherichia coli大鼠抗核膜糖蛋白2抗體(gp2)
可可里亞鎮(zhèn)鏈孢菌Escherichia coli大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)
果生鏈核盤(pán)菌Escherichia coli大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)
淺黃色芽胞八疊球菌Escherichia coli大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)
半裸法氏殼Escherichia coli大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)
腐皮鐮孢菌Escherichia coli大鼠前列腺F2α(PGF2α)
魯氏接合酵母Escherichia coli大鼠前列腺F2α(PGF2α)
桃樹(shù)葉細(xì)菌性穿孔病*Escherichia coli大鼠白三烯E4(LTE4)
普通變形桿菌Escherichia coli大鼠白三烯E4(LTE4)
多粘類芽孢桿菌Escherichia coli大鼠尿激(UK)
磷脂磷水解1抗體多帶革孔菌果子貍肺成纖維樣細(xì)胞
抑癌基因p16/p14/P19抗體中國(guó)擬迷孔菌大額牛皮膚細(xì)胞
過(guò)氧化還原5/6抗體木蹄層孔菌黃牛皮膚細(xì)胞
過(guò)氧化還原1抗體大孢薄孔菌牦牛皮膚細(xì)胞
Mcl-1SMI抑制劑(UMI-77)小孢根霉寡孢變種 (-)-荷包牡丹堿甲化物
草菇 狗牙花定堿
球毛殼 香芹酮
佐久氏沙雷氏 龍血C
三鏈霉 7,4'-二羥基黃酮
枯草芽孢桿 葡萄
黑曲霉 雙(r-三乙氧基硅基基)四硫化物
根霉 大子買麻藤乙
竹喙球 二聚
Roseovarius marinus 珠子草次
紅色紅曲霉 丹參螺縮酮內(nèi)酯,丹參隱
草青霉 3,3',5-三代-L-甲狀腺原
灰鵝膏 松葉菊酮堿
香菇 腰果(C15:1)
解幾丁質(zhì)纖維單胞 去氫膽鈉
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。