當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T諾如病毒(NV)核酸定性檢測試劑盒
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
諾如病毒(NV)核酸定性檢測試劑盒 | RT-PCR法 | FS-P10690 |
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術的定量原理:
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擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據(jù)最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
變幻青霉生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0015提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
匍枝根霉(黑根霉)生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
杏鮑菇生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法
別樣假交替單胞菌產酶微生物/幾丁質酶模式菌株: no水樣/海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 20℃
-1401℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
芽孢桿菌淀粉酶系模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 33生長條件: 37℃
博伊丁假絲酵母培養(yǎng)基: 0013模式菌株: no豆沙提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: 0032遺傳研究提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
薰衣草色鏈霉菌微生物代謝調控研究模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 39生長條件: 28℃
簇生鏈格孢培養(yǎng)基: 14模式菌株: no菜豆葉部提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法
大腸埃希菌培養(yǎng)基: CM0051模式菌株: no腹水提供形式: 凍干物安全等級: 2生長條件: 36℃ -80℃冰箱凍結法
-1402℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
嗜冷桿菌培養(yǎng)基: 471共生微生物/暗紋東方鲀胃腸道共生菌生物樣/暗紋東方鲀胃部提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 20-25℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
美澳型核果褐腐病菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no自然發(fā)病果提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 22-25 定期移植法
青霉屬菌產生真菌素模式菌株: no枯枝枯葉提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 26C
枯草芽孢桿菌聚谷氨模式菌株: no云樓豆豉提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 347生長條件: 37℃
原花青素Ceruloplasmin peptide 銅藍蛋白抗原 真核翻譯起始因子3HIgG
異補骨脂素CKLF1 趨化素樣蛋白 轉錄因子ELK1IgG
鹽小檗堿ART(Artemin)(抗原) eIF4E結合蛋白2IgG
23-乙酰澤瀉BAATK peptide 凋亡關聯(lián)酪氨激酶抗原 核內切酶GIgG
異去甲蟛蜞菊內酯AQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原) 兔抗人、大、小鼠磷化轉錄因子ELK1IgG
羽扇豆ABCA1(ATP binding cassette transporter A1) 腺苷三磷結合盒轉運體A1抗原 真核翻譯起始因子3AIgG
標準品TFPI/LACI 組織因子途徑抑制劑抗體
異鼠李素GLUT12 葡萄糖轉運蛋白12 表皮膜蛋白1IgG
原人參三EGFRvIII 表皮生長因子受體III型突變體抗原 真核翻譯起始因子4GIgG
鹽堿CD26 CD26抗原 內皮抑素/內皮他丁IgG
諾如病毒(NV)核酸定性檢測試劑盒Econazolenitrate 硝益康唑(標準品) 質量規(guī)格:>90%,BS
Entecavir 恩替卡韋 質量規(guī)格:>90%,BS
Entecavir 恩替卡韋(標準品) 質量規(guī)格:>90%,BS
Epalrestat 依帕司他 質量規(guī)格:>90%,BS
EpirubicinHCl 鹽表阿霉素 質量規(guī)格:>90%,BS
EpirubicinHCl 鹽表阿霉素(標準品) 質量規(guī)格:>90%,GC
EptifibatideAcetate 埃替非巴肽,依非巴特;安普利肽,依非巴肽 質量規(guī)格:>90%,GC
Erlotinibhcl 鹽埃羅替尼 質量規(guī)格:>90%,IndGrade
Erlotinibhcl 鹽埃羅替尼(標準品) 質量規(guī)格:>90%,分子生物學級
Ertapenemsodium 爾它培南鈉;厄他培南鈉 質量規(guī)格:>90%,粉末,進分
Estradiol 雌二醇,β-雌二醇 質量規(guī)格:>90%,進分
Estradiol 雌二醇,β-雌二醇(標準品) 質量規(guī)格:>90%,進分
Estriol 雌三醇 質量規(guī)格:>90%,進分
Estriol 雌三醇(標準品) 質量規(guī)格:>90%,進分
Etoposide 泊甙(進分) 質量規(guī)格:>90%,進口
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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