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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> 碘化丙啶PI染色試劑盒
貨號(hào) | FS-X9829 |
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操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
Cell Apoptosis Detection Kit(PI) | 100T | FS-X9829 |
產(chǎn)品介紹:
熒光標(biāo)記是研究細(xì)胞凋亡的基本方法。細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化及生化學(xué)變化都可以通過(guò)熒光標(biāo)記的的方法而檢測(cè)出來(lái),從而區(qū)別鑒別出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞、壞死細(xì)胞以及不同凋亡時(shí)期或細(xì)胞周期。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種DNA 結(jié)合性染料,其激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為536nm 和617nm,產(chǎn)生紅色熒光,但無(wú)膜通透性,不能透過(guò)活細(xì)胞膜,只能染死細(xì)胞。 在熒光顯微鏡下觀察,正常細(xì)胞不能著色,早期凋亡細(xì)胞呈微弱紅光,晚期凋亡細(xì)胞紅光加強(qiáng),壞死細(xì)胞呈強(qiáng)紅色熒光。采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期時(shí),凋亡細(xì)胞因內(nèi)源性核酸酶被激活,使DNA 廣泛降解、斷裂,DNA 結(jié)構(gòu)發(fā)生劇變,隨著凋亡的進(jìn)程,DNA 斷裂產(chǎn)生的小分子量DNA 溢出胞外,細(xì)胞總DNA 量降低,于正常G0/G1 細(xì)胞群前出現(xiàn)一DNA 低染細(xì)胞群,即G1 峰前出現(xiàn)亞二倍體峰(sub-G1)或稱A0 細(xì)胞群,即凋亡細(xì)胞群。用本試劑盒的PI 直接對(duì)細(xì)胞DNA 染色后,進(jìn)行流式細(xì)胞儀分析,即可檢測(cè)到凋亡細(xì)胞DNA的變化。 儲(chǔ)存:2-8℃,避光,有效期一年。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
2,3-二磷甘油(2,3-BPG)英文名:2,3-BPG 1號(hào)染色體開放閱讀框84抗體包裝1g
1號(hào)染色體開放閱讀框85(C1orf85)英文名:C1orf85 E3泛蛋白連接CHIP蛋白抗體包裝5g
17-羥孕(17-OHP)英文名:17-OHP 肉堿O-乙?;D(zhuǎn)移包裝100g
17-β-羥基類固脫氫10(HSD17β10)英文名:HSD17β10 5號(hào)染色體開放閱讀框45抗體包裝25g
155kDa核孔蛋白(NUP155)英文名:NUP155 5號(hào)染色體開放閱讀框48抗體包裝500g
12-羥基二十烷四烯(12-HETE)英文名:12-HETE 6號(hào)染色體開放閱讀框136抗體包裝1g
10kDa熱休克蛋白1(HSP10)英文名:HSP10 6號(hào)染色體開放閱讀框138抗體包裝25g
10kDa干擾γ誘導(dǎo)蛋白(IP10)英文名:IP10 6號(hào)染色體開放閱讀框145抗體包裝5g
107kDa肌多聚磷-4-磷Ⅰ型(INPP4A)英文名:INPP4A CD39抗體包裝100ml
1,25-二羥基維生D3(DHVD3)英文名:DHVD3 6號(hào)染色體開放閱讀框106抗體包裝500ml
2-氧基雌二英文名: Acarbose 6號(hào)染色體開放閱讀框115抗體包裝100ml
2-巰基乙烷磺鈉(美司那)英文名: Acarbose 6號(hào)染色體開放閱讀框123抗體包裝500ml
5-氮胞/阿扎胞/5-氮雜胞嘧啶核英文名: Acyclovir6號(hào)染色體開放閱讀框129抗體包裝1g
6-硫鳥英文名: Acyclovir6號(hào)染色體開放閱讀框129抗體包裝5g
Alectinib;CH5424802英文名: Adenosine6號(hào)染色體開放閱讀框132抗體包裝25g
致病性大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胰高血糖樣肽2受體試劑盒異麥角甾;Isoacteoside
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereu 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR胰高血糖樣肽2試劑盒鳶尾黃;Tectorigenin
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品胰高血糖樣肽1受體試劑盒蕓香柚皮;Narirutin
碘化丙啶PI染色試劑盒凍干補(bǔ)體 R-2,6-二氨基-4,5,6,7-四氫苯并噻唑神經(jīng)顆粒
美澳型核果褐腐病 環(huán)十五內(nèi)酯傳染性胸膜肺炎
Paenibacillus 4-乙炔基可替寧
大腸埃希 1,4,7-基二乙烯三激肽釋放原
大腸埃希 二(氧根)羰基鈦(IV)水合物, Puratronic硫代反應(yīng)物
大腸埃希 溴化鋇, 無(wú)水堿性磷
黃硬皮馬勃 5-氨基-吡唑-3-甲乙酯蔗糖異麥芽糖
柱孢綠僵 3-(2,5-二甲氧基苯基)蔗糖異麥芽糖
美麗胡枝子根瘤 3-氨基-4-三氟甲苯白介39
棉阿舒囊霉 4--3-甲?;筋w粒A
綠色木霉 5-基-1H--2-羧乙酯穿孔;成孔蛋白
大腸埃希 5-乙氧基殼三糖
釀酒酵母 尿刊登革熱病
弓形蟲(GTS-2株) 4-溴-1,1,2-三氟-1-乙型肝炎病
灰樹花-4 MDA 19絲蛋白抑制劑B1
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