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貨號 | FS-X10808 |
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產(chǎn)品介紹:
FGF-401是FGFR4的抑制劑,IC50值為1.9nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1708971-55-4 純度:98.0% 分子量:506.56 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:FGFR4抑制劑(FGF-401)
英文名稱:FGF-401
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10808
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
鼠傷門氏菌小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類Anti-NHLH1 Antibody人同型半胱(Hcy)
釀酒酵母小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白Anti-NKTR Antibody人同型半胱(Hcy)
矮棒曲霉人白介27Anti-NID1 Antibody人游離脂肪(FFA)
發(fā)酵畢赤酵母大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體Anti-NKX2-1 Antibody人游離脂肪(FFA)
釀酒酵母人白介28Anti-NIFK Antibody人骨粘連蛋白(ON)
棘孢曲霉人白介29Anti-NKX2-6 Antibody人骨粘連蛋白(ON)
墨西哥畢赤酵母大鼠凋亡誘導因子Anti-NKX2-4 Antibody人葉(FA)
枯草芽孢桿菌人白介23Anti-NKX2-6 Antibody人葉(FA)
暗黑鏈霉菌小鼠CD30分子Anti-NKx2.2 Antibody 人內(ET)
雙孢蘑菇小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類Anti-NKX3-1 Antibody人內(ET)
光滑青霉人巨噬移動抑制因子Anti-NKX2-8 Antibody人過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)
居巖牙殖球菌大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體Anti-NKX6-3 Antibody人過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)
環(huán)柄菇人組織因子途徑抑制物Anti-NLRX1 Antibody人環(huán)孢A(CsA)
擬青霉小鼠可溶性血管內皮蛋白C受體Anti-NKX6-3 Antibody人環(huán)孢A(CsA)
彩色豆馬勃大鼠堿性磷Anti-NLE1 Antibody人神經(jīng)膠質纖維性蛋白(GFAP)
釀酒酵母人干擾誘導蛋白10Anti-NMBR Antibody人神經(jīng)膠質纖維性蛋白(GFAP)
軟骨肉瘤相關蛋白2抗體火木層孔菌人肝癌細胞(干細胞庫保藏)
腎結合蛋白抗體淺黃褐栓菌人間皮瘤細胞
環(huán)指蛋白211抗體#放射形土壤桿菌人髓母細胞瘤細胞Daoy(干細胞庫保藏)
RET指蛋白樣2/3抗體#需土節(jié)桿菌人小細胞肺癌
FGFR4抑制劑(FGF-401)大腸埃希 2-乙酰基吡抑制蛋白
殼蕉孢 馬鈴薯-蔗糖培養(yǎng)基磷化B
雜色尾孢 無機鹽瓊脂培養(yǎng)基纖溶抑制因子;凝血激活的纖溶抑制物
類動膠杜搟氏屬 卵黃雙抗培養(yǎng)基(EPV)白介10β
休哈塔假絲酵母休哈塔亞種 茴香二甲基縮前列腺E合2
大豆慢生根瘤 匹克氏肉湯基礎B6酮前列腺
解桿 亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液(BGB)血栓
柑橘炭疽盤孢 基代磺早孕因子蛋白
大腸埃希 沙門氏成套生化鑒定管(SMGB)不飽和脂肪
喜鹽芽孢桿 霍亂弧成套生化鑒定管飽和脂肪
樟疫霉 沙門氏成套生化鑒定管(S)出血熱抗體
熱帶假絲酵母 蠟樣芽孢桿成套生化鑒定管2,3-二磷甘油
Microbacterium pumilum 單增李斯特氏成套生化鑒定管紅膜蛋白
斯氏假單胞 副溶血性弧成套生化鑒定管(SN/T0173-2010)Ⅰ型前膠原N端前肽
淡紫犁頭霉 O157成套生化鑒定管抗性磷
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