STAT3抑制劑(Cryptotanshinone)-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-X10478

產(chǎn)品介紹:

英文名稱：Cryptotanshinone

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

Cryptotanshinone是一種有效的STAT3抑制劑，IC50值為4.6μM，在前列腺癌細(xì)胞DU145中，抑制STAT3Tyr705磷酸化作用。

注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號(hào)：35825-57-1

別名：Cryptotanshinon;Tanshinone c

純度：98.51%

分子量：296.36

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

中文名稱：STAT3抑制劑(Cryptotanshinone)

英文名稱：Cryptotanshinone

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

貨號(hào)：FS-X10478

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

矩圓黑盤孢視黃結(jié)合蛋白1抗體Anti-EPHA3 Antibody胰島樣生長因子不穩(wěn)定亞基(IGFALS)

嗜麥芽糖寡養(yǎng)單胞菌視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白6抗體Anti-EPHA5 Antibody胰島樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7)

枯斑擬盤多毛孢核糖體結(jié)合蛋白1抗體Anti-EPHB2 Antibody胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)

地衣芽胞桿菌核糖體蛋白L5抗體Anti-EPHB1 Antibody胰島樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP5)

環(huán)發(fā)仙菌磷化RNA聚合II CTD抗體Anti-EPHB3 Antibody胰島樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)

擬無枝菌菌磷化RNA聚合II CTD抗體Anti-EPHX2 Antibody胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)

產(chǎn)黃青霉血管生成核糖核4抗體(肌性側(cè)索硬化癥蛋白)Anti-EPHB3 Antibody胰島樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)

費(fèi)氏中華根瘤菌核糖體蛋白L19抗體Anti-EPO Antibody胰島樣生長因子2受體(IGF2R)

聚多曲霉Ras樣蛋白家族10A抗體Anti-EPO Antibody胰島樣生長因子2-mRNA結(jié)合蛋白3(IGF2BP3)

維氏氣單胞菌Ras相關(guān)區(qū)域家族蛋白4抗體Anti-EPO Antibody胰島樣生長因子2(IGF2)

塔賓曲霉RNA尿合結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體Anti-EPO Antibody胰島樣生長因子1受體(IGF1R)

發(fā)酵性酵母環(huán)指蛋白14抗體Anti-EPOR Antibody胰島樣生長因子1(IGF1)

淺綠黃鏈霉菌鳥核交換因子抗體Anti-EPOR Antibody胰島樣蛋白5(INSL5)

紅緣擬層孔菌核糖體結(jié)合因子RBFA抗體Anti-EPOR Antibody胰島樣蛋白3(INSL3)

煙曲霉環(huán)指蛋白166抗體Anti-Epsilon-sarcoglycan(SGCE) Antibody胰島受體(ISR)

煙色離褶傘視網(wǎng)膜色變性蛋白1抗體Anti-EPS15 AntibodyX3(TRYX3)

福氏志賀氏菌Shigella│flexneri 質(zhì)量規(guī)格：0.985

大腸埃希氏菌DH5a/pET20b/PasecAEscherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：0.98

嗜鹽潮間帶桿菌Aestuariibacter│halophilus 質(zhì)量規(guī)格：98%，BR
STAT3抑制劑(Cryptotanshinone)乳桿屬三(3,5-二叔丁基-4-羥芐基)異脲酯α平滑肌肌動(dòng)蛋白抗體

絨毛青霉二甲基十八烷基[3-氧基硅基]化番茄紅

柄桿 5-噻吩-2-磺酰尿

尖孢鐮刀 BOC-L-絲甲酯三磷腺受體

生癌腸桿矢車菊半乳糖肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移II

大腸桿 2,4-二-6,7-二甲氧基喹唑啉CD133分子

白僵 (±)-哌-2-羧B瘤-X

土曲霉金色變種 1-芐基哌B瘤-W

地衣芽孢桿替洛隆雄酮

嗜鹽動(dòng)性球 2-溴乙基基溴化可溶性補(bǔ)體受體

三葉草根瘤 4-羥基-8-甲氧基喹啉-3-羧乙酯雄甾酮

木賊鐮孢 1,3-二甲基-5-吡唑酮雌三

麥根腐平臍蠕孢 2-甲氧基-4-氨基甲酯卵清蛋白

平菇(南京1號(hào)) L-氨基琥珀脫氫

青霉 1-(4,4'-二氟苯甲基)哌轉(zhuǎn)化生長因子β受體1

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