當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T艱難梭菌(TCD-B)核酸定性檢測試劑盒
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
艱難梭菌(TCD-B)核酸定性檢測試劑盒 | PCR法 | FS-P10686 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
綠色木霉培養(yǎng)基: 14模式菌株: no蘋果枝干提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法
毛韌革菌食用模式菌株: no腐木提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 17生長條件: 20℃
釀酒酵母用于釀酒模式菌株: no酒曲提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 13生長條件: 30℃
-1394℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
類芽孢桿菌培養(yǎng)基: 512微生物/低溫菌(15℃)土壤/河邊水草根際土提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 15℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
柱狀嗜纖維菌培養(yǎng)基: 2魚類微生態(tài)學(xué)研究斑點叉尾魚回提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 真空冷凍干燥法;定期移植法
禾谷鐮孢生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no
鏈霉菌屬菌種抗金黃色葡萄球菌模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C
淡天藍鏈霉菌培養(yǎng)基: 12模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 真空冷凍干燥法
唾液鏈球菌模式菌株: 未知
-1395℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
金龜子綠僵菌培養(yǎng)基: CM0014模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 26C -80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
華美鏈霉菌生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 0012提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
柞蠶鏈球菌蠶病原菌模式菌株: no病蠶提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0032生長條件: 30℃
鮑姆木層孔菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no杏提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法
球毛殼培養(yǎng)基: CM0014模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 26C -80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
柚皮苷5-HT(5-Hydroxy-L-tryptophan/L-5-HTP) 5-羥色胺 內(nèi)皮的分化蛋白6IgG
異歐前胡素AM (Adrenomedullin; ADM) 腎上腺髓質(zhì)素(多肽抗原) 溶血磷脂受體蛋白3IgG
異甘草素5-HTR1A (5-HT1A (5-hydroxytryptamine/serotonin receptor 1A; 5HT1a; ADRBRL1; ADRB2RL1; HTR1A) 5-羥色胺受體1A(多肽) 抗內(nèi)皮素受體AIgG
鷹嘴豆芽素AAnnexin Ⅲ peptide 膜粘連蛋白A3抗體 延伸因子EF-1aIgG
異去氫鉤藤堿TIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2) 金屬蛋白酶組織抑制因子-2(抗原) 真核翻譯延長因子2IgG
遠志皂苷元TIMP-3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3) 金屬蛋白酶組織抑制因子(抗原) 真核延伸因子激酶2IgG
標(biāo)準(zhǔn)品Proinsulin 胰島素原抗體
野黃芩苷ADM R, Adrenomedullin receptor 腎上腺髓質(zhì)素受體(抗原) 磷化真核延伸因子激酶2IgG
氧化苦參堿PAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子 磷化真核翻譯延長因子2IgG
亞麻木酚素CK7 角蛋白7 表皮生長因子IgG
艱難梭菌(TCD-B)核酸定性檢測試劑盒ColistinSulphate 硫粘桿菌素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>80.0%(GC)
EflornithineHCl 鹽依氟鳥氨 質(zhì)量規(guī)格:>800µg/mg,USP
Cromolynsodium 色甘鈉 質(zhì)量規(guī)格:>800μg/mg,USP,BR
Cromolynsodium 色甘鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>800μg/mg,含量測定
CyclosporineA 環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A 質(zhì)量規(guī)格:>85%
CyclosporineA 環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>85%,BR
TiclopidineHCl 鹽噻匹定 質(zhì)量規(guī)格:>85%,BR
TiclopidineHCl 鹽噻匹定(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>85%,BR
Cytarabine 阿糖胞苷(進分) 質(zhì)量規(guī)格:>85%,BS
Cytarabine 阿糖胞苷 質(zhì)量規(guī)格:>85%,分子生物學(xué)級
Cytarabine 阿糖胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>85%,美國進口
Dacarbazine 達卡巴嗪 質(zhì)量規(guī)格:>85.0%(E)
Dacarbazine 達卡巴嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>85.0%(GC)
Dasatinib 達沙替尼(無水) 質(zhì)量規(guī)格:>85.0%(HPLC)
Dasatinib 達沙替尼(無水)(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>850mcg/mg,BR
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