當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T馬傳染性貧血(EIAV)核酸檢測試劑盒
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
馬傳染性貧血(EIAV)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10363 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
-413℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
蛹蟲草培養(yǎng)基: 0014保健、藥用提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
蝕脈鐮孢培養(yǎng)基: 0014棉花枯萎病菌提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
柔嫩艾美耳球蟲可供教學科研等使用。模式菌株: no雞的糞便提供形式: 其他安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
釀酒酵母生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 307提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法
鴨疫里氏桿菌培養(yǎng)基: 0科研教學鴨心血安全等級: 2模式菌株: no生長條件: 37 真空冷凍干燥法;
IOCM30生長條件: 28-30℃培養(yǎng)基: 9種屬: Bradyrhizobiumsp安全等級: 1模式菌株: no
-414℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
輪枝菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no水中底泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1生長條件: 25℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
AS2.185耐高糖。模式菌株: no種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28℃
雞痘病研究模式菌株: no病雞結(jié)痂提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
#蟬花8-3培養(yǎng)基: 14模式菌株: no子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 28 定期移植法
鏈霉菌屬菌種抗耐藥細菌模式菌株: no海底淤泥提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C
No.359強 D模式菌株: no種屬: Clostridium│botulinum提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: CM0121生長條件: 37℃
-415℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
傳染性法氏囊病病研究模式菌株: no病雞提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
扶硅(*)Fluorosilicic acidAR500ml
0437-25GL-Lysine,xy7nochloride L-賴安鹽鹽62005-4-425g46
F0127-1KGD-Fructose D-果糖57-48-71kg
Hoechst 33258染色液10ml
metxylene Green25g
無水乙醇¤etxyl alcoholGCS2ml
ER1641SatI (Fnu4HI)200 units3
G9764-500GGelatin 明膠9000-70-8500g
Cresol Red, Free Acid25g
Zeatin100mg
大鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISA試劑盒 ,英文名: GSSG ELISA Kit
人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA檢測試劑盒Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 96T/48T
大鼠T活化核因子5(NFAT5)免疫試劑盒 Rat nuclear factor of activated T-cells 5,NFAT5 ELISA Kit
CLIAKitforsRANKL(Mousesolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand)ELISAKit小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基規(guī)格:48T/96T
人血液纖維蛋白原(fibrinogen)免疫比濁法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitLPAg人軍團菌抗原規(guī)格:48T/96T
馬傳染性貧血(EIAV)核酸檢測試劑盒抗生素5號規(guī)格:250g用途:用于兩性霉素B檢定菌種培養(yǎng)
PBS緩沖液(PH7.4)規(guī)格:250g用途:用于檢測李斯特氏菌時樣品的制備
李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ)顆粒規(guī)格:250g拉丁屬名:Listeria Enrichment Broth Base
麥芽汁培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于霉菌和酵母菌增菌培養(yǎng)
腦心浸液肉湯(BHI)規(guī)格:250g用途:用于營養(yǎng)苛求細菌的增菌培養(yǎng)
性蛋白胨水規(guī)格:250g用途:用于霍亂弧菌選擇性增菌培養(yǎng)(SN標準)
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